人结核杆菌特异性抗原的表达与制备文献综述

 2022-12-06 05:12

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

研究背景及现状:

结核病(tuberculosis,TB) 是目前危害全球人类健康的主要传染病,由结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,MTB)所致的以感染呼吸道为主的慢性传染病.据2011年的WHO统计报告2011全球新增结核病病例860万,死亡110万。我国结核病人数居世界第二,仅次于印度。[1]绝大多数患者缺乏因为缺乏有效的检查而造成误诊和漏诊,延误治疗。

目前结核病的检测方法有三种:细菌学检查,分子生物学检查,血清学检查。细菌学检查是结核病确诊的依据,但涂片抗酸染色法敏感性一般仅为 20%-40%;常规结核菌培养需时 4-8 周,而且阳性率也不超过 50%,耗费时间且准确性不高。基因诊断分子生物学检查,如聚合酶链反应(PCR)技术、DNA 指纹图谱技术、基因探针分子杂交技术及基因芯片技术等对结核病的诊断具有较高的敏感性和特异性,但这些技术实验条件要求高,而且只适合对排菌病人进行检查,不适合大规模检查,实际应用意义不大。与之前俩种方法比较,血清学检查方法简单、快速,无需特殊精密仪器,不依赖对病原菌的检查,对痰涂片阴性的肺结核、肺外结核和不易获得痰标本的儿童结核的诊断具有重要价值,特别是随着基因重组与蛋白纯化技术、免疫学标记物及其探测技术的不断发展,有多种纯化的特异性抗原可采用,有多种精确的方法可选择,其诊断的敏感性和特异性不断地提高,是目前最适合的方法 。[2]

血清学检查因为主要是检测特异性抗体,所以制备性质稳定,成分单一,易于标准化的抗原至关重。目前,有几种蛋白在血清实验中表现较好,如 38KDa 、Ag85B、16ku、MPT64、ESAT-6、CFP-10等。[3]

研究目的:

制备适合血清学检查的特异性抗原,用于检查特异性抗体

研究手段:

通过分子生物学知识分析人结核杆菌的蛋白序列,筛选出特异性的蛋白片段,优化蛋白片段的基因序列并化学合成,提取质粒,构建重组工程菌,表达特异性蛋白,分离纯化,用于检测结核杆菌特异性抗体。

文献综述:

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