开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、研究背景及拟解决问题
归柏化瘀提取物为归柏化瘀胶囊的中间产品，由当归、黄柏、白芍、醋延胡索、甘草等组成。具有活血化瘀、清利湿热的功效。用于慢性非细菌性前列腺炎血淤兼湿热证，症见尿频，尿急，尿痛，尿道口常有少量粘液，口苦，小便短黄。白芍 (Pasonia lactiflora Pall) 系毛莨科植物的去外皮干燥根, 性微寒, 味苦酸。有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗的功能[1]。白芍中含有多种化学成分, 包括单萜及其苷类、黄酮、鞣质、多糖等, 其主要有效成分为芍药苷，占白芍总苷量的90%以上[2]。芍药苷也是白芍质量控制的指标性成分[2]。芍药苷（Paeoniflorin，PF）是一种单萜类糖苷化合物[3]，属蒎烷单萜苷类，为类白色粉末，熔点为196 ℃，易溶于水、甲醇、乙醇，在pH2～6条件下稳定，在碱性条件下不稳定[8,9] 。芍药苷具有镇静、抗惊厥、镇痛、抗炎、抗血小板聚集、抗氧化应激等药理作用。众多的研究发现芍药苷对免疫性肝炎、非酒精性脂肪肝、化学性肝损伤、放射性肝损伤等疾病均有一定的治疗作用[4]。
由于白芍中芍药苷的含量较高, 检测较为容易, 通常用高效液相色谱法, 中药复方制剂中也通常选用测定芍药苷的含量为制剂质量标准[5]。在药典中芍药苷的含量测定均采用 HPLC 法，但各制剂中芍药苷的提取方法各异，且提取溶剂各不相同，基本上没有统一的供试品溶液制备方法。而且，利用HPLC 进行含量测定，不同流动相会影响谱图、分离度、峰形等，给科研工作带来一定的困难[10]。
有研究表明, 流动相中加入甲酸或缓冲液能够获得较好的峰型和分离效果[6,7]。流动相的选择无疑是影响实验结果的重要因素, 造成如此多样流动相选择差异的原因, 可能与样品的处理、HPLC检测设备差异等的不同有关[5]。高效液相色谱法测定芍药苷的流动相多为甲醇－水、乙腈－水、甲醇－磷酸水、乙腈－磷酸水，还有一些流动相会加入一定的酸或缓冲溶液可减少拖尾，提高灵敏度，多少根据具体实验而定;加磷酸二氢盐能起到调节 pH 值和离子抑制剂的作用，一般能与其他组分达到基线分离[11,12,13] 。
芍药总苷高效液相色谱指纹图谱研究中对流动相的组成及洗脱方式分别进行了考察优化。乙腈-水 (磷酸) 体系可使大多数色谱峰峰形较好;等度洗脱测定时分离效果较差, 如以梯度洗脱法则在40 min内可使大部分色谱峰得到基线分离。由于每次进样量较大, 柱内易残留样品 ,影响下次分离效果 , 实验证明, 以梯度洗脱程序运行 40min, 然后以终浓度等度洗脱再运行 10 min, 可基本除去残留样品。另外, 每次运行后柱平衡时间至少需要 10 min,才能确保下次分析时色谱峰的峰形及分离度[14]。
因此，本课题探究对以高效液相色谱法测定芍药苷的含量的方法进行优化研究，以致建立快速、简单、准确的归柏化瘀提取物中芍药苷的含量测定方法。
- 研究方法
（一）、色谱柱选择
选取不同厂商不同规格的色谱柱进行考查。
（二）、流动相选择
