调研综述 理论研究[实验目的]据研究发现，P2具有很好的抗肿瘤特性，抑制血管生成，因而研究其在体内的药代动力学过程是很有必要的，了解该药物的体内代谢特性和安全性，这对于监测和指导临床用药具有重要的应用意义 ，能很好的为P2临床药代动力学研究及其它临床研究奠定基础。
[拟研究或解决的问题]1.1包被抗原和单抗工作浓度的确立； 1.2酶标二抗工作浓度的确立；1.3小鼠血药浓度的测定； 1.4标准曲线拟合及测定范围；1.5灵敏度、精密度、回收率和稳定性测定结果。
[实验方法的建立及验证]2.1偶联抗原的制备采用戊二醛二步法：取12 mg BSA溶解于1 ml 0.1 mol/L PBS(pH 7.4)，加新鲜配置1.5%戊二醛(GA)溶液1.5 ml，于室温反应约6 h。
将反应液对0.01 mol/LPBS(pH 7.4)于4 ℃透析过夜。
在透析内液中加入6 mg PBS溶解的P2，反应10 h，对0.01 mol/L PBS (pH 7.4)于4 ℃透析过夜。
收集透析内液，EP管分装每管10 mu;l，于-20 ℃保存。
-2.2 间接竞争ELISA测定P2血药浓度的基本程序(1) 包被：将P2用包被液以1:800浓度稀释，加入酶标板中，每孔200mu;l，4℃过夜。
(2) 洗板：将包被液弃去，每孔加入200mu;l 洗液，PBST洗涤3次，每次3min，拍干。
(3) 封闭：每孔加入200mu;l 封闭液，37℃水浴放置1.5 h，重复洗板过程，拍干。
(4) 加待测样品和抗体：酶标板中先加入100mu;l待测样品，再加入100 mu;l 1:20000浓度稀释的单抗，设4个复孔，于37℃摇床震荡混匀2min，再移至37℃水浴锅放置1 h，进行间接竞争ELISA反应。
