1.研究背景
巨噬细胞是人体固有免疫系统中重要的免疫细胞，由血管中的单核细胞透过血管分化而来。巨噬细胞在生理静息状态下，其功能常表现为吞噬清理凋亡细胞碎片等的清道夫功能。巨噬细胞可分为常驻巨噬细胞和渗出巨噬细胞，二者均可在受到组织微环境的刺激和作用后转变为活化的巨噬细胞。[1] 然而在不同的微环境中，巨噬细胞可活化为不同类型，此种特性称为巨噬细胞的异质性，表现为形状、代谢、功能和表面标志分子不同，这一过程也可称为巨噬细胞的极化作用。[2] 巨噬细胞接受细菌、病毒抗原以及T细胞等免疫细胞分泌的细胞因子刺激后激活，可具有吞噬感染细胞，杀死胞内病原体，抗原提呈作用（APC）和分泌促炎或抗炎细胞因子作用。[3]
已有研究表明，根据激活信号分子以及信号通路不同，激活途径分为两种，即经典激活途径和替代激活途径，极化产生M1型和M2型巨噬细胞。[4] GM-CSF和M-CSF分别刺激极化产生M1和M2型，在免疫系统中可由M1和M2介导趋化的不同反应将Th反应和NK细胞分为I型和II型。[5] 经典激活途径中，Th1型细胞因子IFN-gamma;结合病原体相关模式分子（PAMP），比如细菌细胞壁分子脂多糖（LPS）可刺激产生M1型。M1通过分泌多种促炎因子，介导炎症反应，增强吞噬及杀伤病原体反应，促进Th1型反应。而在Th2型细胞因子和不同与I型的可替代激活物分子作用下产生的激活途径称为替代激活途径，产生M2。M2型巨噬细胞可分为三种亚型，M2a，M2b和M2c。其中M2a的极化作用是由IL-4/13介导替代激活途径，而由免疫复合物活化的M2b可分泌大量IL-10，此种途径后被免疫学家归类为II型激活途径，M2c巨噬细胞常常与免疫反应的抑制终止有关。[4] M2常发挥抗炎作用。
巨噬细胞的极化作用和异质性与多种疾病发生和作用过程相关联，不同类型极化巨噬细胞在介导疾病的作用机制中发挥不同作用，甚至是相反作用。M1型参与诱导胰岛素抵抗作用，而M2则通过分泌抗炎因子和胰岛素分泌调节因子改善胰岛素抵抗作用。然而M2型更易感染HIV病毒损害机体免疫系统，促进肿瘤细胞的生长、转移、侵染和血管生成，有潜在致动脉粥样硬化的作用。[6]因此阐明巨噬细胞的极化机制和在不同病理微环境的极化类型对于临床选择用药和治疗方案具有重要意义。医生在考虑用药为病人消除炎症反应时必须考虑到在抗炎过程中极化的M2型巨噬细胞是否可诱发其他潜在疾病，或恶化由M2所致的疾病。
溶菌酶是在生物体内广泛分布的一种黏多糖水解酶，具有抗菌、抗病毒、抗炎、增强抗生素疗效及加快组织恢复的作用。目前，溶菌酶多用于治疗慢性鼻炎、急慢性咽喉炎、口腔溃疡、水痘、带状疱疹和扁平疣等。溶菌酶不仅具有抗生素功能，还在抗肿瘤、镇痛、抗病毒等方面具有临床效果。[7]
杰隆生物的转基因研究中心利用自有的重组人溶菌酶产品已在前期研究表明，在体对小鼠灌胃给药后，巨噬细胞的吞噬活性和肿瘤细胞杀伤活性提高。可在此基础上对溶菌酶对离体细胞极其作用机制进行深入研究。
2.研究目的
前期研究表明重组人溶菌酶对在体巨噬细胞有免疫活性增强作用，在本课题中首先研究重组人溶菌酶对离体腹腔巨噬细胞有免疫活性调节作用，前阶段的预实验已表明重组人溶菌酶对离体巨噬细胞有免疫增强作用。在此基础上，需要进一步探讨溶菌酶对巨噬细胞刺激激活后的极化类型。同时，也需要考虑重组人溶菌酶的免疫调节作用针对细胞数还是单一细胞的活性。
3.研究意义
