Rb对LTG减毒作用的机制研究文献综述

 2023-01-13 05:01

拟解决的关键问题:

1、建立慢性癫痫动物模型微透析的方法。通过清醒动物脑内微透析的方法可以直接监测慢性癫痫动物脑内各种氨基酸水平的变化,从而在更接近正常生理水平的条件下获得氨基酸动态变化数据。

2、研究人参皂苷组分Rb对拉莫三嗪(LTG)停药反应的减毒机制,减少药物的不应性和难耐性,提高病人的生活质量。

研究方法

1、 建立大鼠慢性癫痫模型:腹腔注射130mg/kg LiCl, 17-18h后皮下注射1mg/kg 东莨菪碱,30min后腹腔注射30mg/kg Pilo,SE持续90min后腹腔注射10mg/kg 地西泮及灌胃50mg/kg 苯妥英钠终止癫痫。5-8h后再给予6mg/kg 地西泮及灌胃50mg/kg 苯妥英钠。所有药物用NS配制,东莨菪碱给药体积为0.1ml/100g;其他药物给药体积均为0.2ml/100g。在动物造模一个月后,观察动物一周内癫痫发作情况(包括发作次数、发作级别和发作频率),选择发作稳定的动物作为实验组。

2、动物装套管:动物用戊巴比妥钠麻醉,在无菌操作条件下(包括手术室紫外杀菌,手术器械高温灭菌,套管在青霉素溶液中浸泡过夜),用大鼠脑立体定位仪定位,套管坐标为AP-5.6,L-4.8(相对前囟),V-3.6mm(相对硬脑膜),插入套管,用牙科水泥固定并掩盖创口。装好后动物给予3ml5%的葡萄糖溶液和30万单位的青霉素,单笼饲养,恢复一周。

3、清醒动物脑内微透析:用微透析方法测量恢复后模型鼠脑内的氨基酸水平(包括谷氨酸、gamma;-氨基丁酸、谷氨酰胺、丝氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、牛磺酸)作为基础值。

动物用异氟烷麻醉,插入探针,稳定4h后,每10min一个样,收集9个样。前一天测定使用探针的透过率。HPLC测定三个样品的氨基酸含量,其他备用。以3个样本的平均值作为给动物给药期间脑内氨基酸水平。动物微透析结束后,戊巴比妥钠麻醉,取下探针。每天微透析4只动物。早上八点插入第一、二根探针,大约下午13:30-14:00插入第三、四根探针。时间固定,保证采集的微透析样本在每天的相同时间点,避免动物生物钟的影响。实验中共有两套清醒活动装置,每只动物操作时注明使用装置类型(Raturn or Swirl),每组动物平均使用两种装置(3 Raturn 2 Swirl or 3Swirl 2 Raturn)。

4、动物分组、给药:根据动物癫痫发作情况,以及测定的氨基酸基础值给动物分组、给药。Control, Rb(5 mg/kg), LTG(10mg/kg),Rb(5mg/kg) LTG(20mg/kg),每组各4只。

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