立题依据、意义：
随着大量生物技术药物的研发，生物技术药物的评价越来越受到重视。生物技术药物一般具有结构复杂、分子量大及异源性等特点，与传统小分子药物不同，其具有较强的免疫原性。免疫原性是指免疫系统感知到生物制品中的外来/非自我或危险信号/应激自我，并对其产生特异性的免疫反应，从而在体内产生针对药物的抗体，即抗药抗体（anti-drug antibody, ADA）。所有生物技术药物都有可能引发宿主免疫反应，这可能会导致无可预估的临床后果或出现罕见又严重的不良事件。非临床研究表明ADA可能会中和药物的活性，影响药物的清除、血浆半衰期和组织分布，改变药效或药动学，使在非临床研究中观察到的效应可能并非药物真正的药理和(或)毒性反应。临床研究发现ADA与药物及内源性同系蛋白(交叉反应)结合后，可能会导致该蛋白缺陷综合征，对药物的免疫应答可能会导致过敏反应。免疫原性检测是生物技术药物安全性评价的组成部分,药物引起的免疫原性反应会影响药动学、药效和/或毒性。因此在临床前和临床试验中评价免疫原性是生物技术药物申请临床试验和上市注册的重要内容。
目前免疫原性检测方法有很多，常用的检测方法包括酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）、电化学发光测定（electrochemiluminescence, ECL）、放射免疫法和表面等离子共振法等。ADA检测结果有助于解释药物的免疫原性、药代动力学、药效学、安全性和有效性。但是检测的准确与否取决于分析方法的部分重要参数。例如，灵敏度和药物耐受、特异性等。此外，还受其它多种因素的影响，包括检测方法、样本处理、样本采集时间、药物联用及疾病状况等。试验中所获得的样本（一般为血清或血浆）需使用充分验证的分析方法进行检测。在申请药物上市许可时，需要提供证明该方法经过全验证的数据。全验证需要证明该方法对于预期的ADA检测是适用的，其基本验证项包括：临界值、灵敏度和药物耐受、特异性和选择性、精密度、相关的重现性、某些测定条件的稳健性和关键试剂的稳定性。药物耐受是指在一定阳性对照抗体存在情况下可被连续检测为阳性时的最高药物浓度，该验证项的目的是评估对生物技术药物的干扰的抵抗能力，是方法开发中的关键因素之一。
从受试者获得的血清或血浆样品是各种因子的复杂混合物，其可能干扰免疫原性测定中ADA的检测。样本中既包括游离的ADA，也有ADA-药物复合物。药物本身是干扰因素之一，在待测样本中药物的含量过高时，用作捕获和/或检测的标记形式的药物可能无法与样品中的未标记药物竞争，无法形成夹心复合物，导致免疫原性测定中潜在的假阴性结果。药物耐受作为方法开发过程中主要关注点之一，尽可能消除药物对测定体系的干扰，可改善免疫原性检测中的耐药性问题。改善免疫原性检测中耐药性问题，可以从2个角度进行考虑：①将药物从待测样本中去除。ADA检测的主要干扰物质为药物本身，因此最直接的方法就是将药物从待测样本中清除，分离去除游离药物，减少药物干扰；②破坏血清中ADA-药物复合物。当ADA以复合物的形式存在时，其无法参与形成信号通路，使测定信号值比实际偏低。可以通过酸解将ADA从ADA-药物复合物中解离。
药物耐受作为免疫原性检测方法领域的主要挑战之一，目前已有文献报道的提高药物耐受的方法，包括酸解离、液相ELISA、沉淀与酸解离(precipitation and acid dissociation, PandA)、磁珠提取与酸解离(bead extraction and acid dissociation, BEAD)和磁珠提取与热解离(bead-extraction and heat-dissociation, BEHD)。除此以外，不同的检测平台由于灵敏度、检测范围等性能差异，也会影响药物耐受水平。
目前文献报道方法众多，但针对不同方法的对比研究文献较少，本课题选用抗PD-L1单克隆抗体，结合实验室具体条件，对方法建立过程中不同检测方法与检测平台进行对比研究，考察其在药物耐受以及方法灵敏度方面的具体差异，在建立过程中总结不同方法的优缺点，并模拟样品进行部分验证，为后续在选择不同检测方法及平台，满足不同检测需求的工作提供基础。
研究途径与方法（预期思路或技术路线）
药物选择：
