文献综述
一、研究背景次氯酸是生物体内一种重要的活性氧 (ROS) 物种, 人类免疫功能系统中扮演着重要的角色。
在生理条件下, 次氯酸由过氧化氢和氯离子在髓过氧化物酶 (MPO) 的作用下产生, 是正常细胞代谢的副产物之一。
次氯酸的反应活性高、氧化性强, 可以有效杀死细菌和病原体,正常条件下, 次氯酸会部分解离成次氯酸阴离子, 并保持一定的解离平衡,有助于生物体内对细菌的破坏;但在应激或疾病状态下, 机体可能分解出过量的次氯酸阴离子, 进而破坏如DNA、RNA、脂肪酸和蛋白质等生物大分子, 最终引起心血管疾病、红细胞破损、肾脏疾病 神经退行性疾病以及癌症等的发生和发展。
因此,鉴于HClO在生物学上的重要性, 有效、多手段地监测生命系统中次氯酸浓度的变化、研究活细胞中次氯酸的动态分布,是至关重要的[1]。
而可用于检测HClO/ClO-的方法有很多,如碘量滴定法、比色法、化学发光法、库仑法、极谱法和辐解法等。
但这些方法比较繁琐,同时其检测工作必须在有机介质或有机/水介质中进行,导致应用受到限制。
与此相比,荧光探针被认为是生物研究的理想手段,因为其所需的仪器相对简单,选择性和灵敏度高,检测范围广,响应时间快速,而且检测过程对样品没有破坏,对细胞危害也很小,同时荧光检测结合显微镜可以提供实时结果。
在过去的十几年中,众研究者己经开发了许多小分子HClO荧光探针。
通过对探针的选择性、敏感度和稳定性等条件的优化,多种HClO探针成功地实现了在生物医学研究中的实际应用[2]。
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