开题报告名称：DDP-IV抑制剂与MH复方缓释制剂的犬体内药动学研究
一、研究的主要目的和意义：
糖尿病（Diabetes Mellitus，DM）是一种因胰岛素分泌相对或绝对不足，以及 靶组织细胞对胰岛素敏感性降低，而引起血糖升高，继而引发蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征。目前临床上主要有I型（胰岛素依赖型) 和II型（非胰岛素依赖型) 两种类型。糖尿病是一种终身性疾病，患者需要长期用药，目前临床应用的降血糖药物有很多，主要有胰岛素、葡萄糖吸收抑制剂、胰岛素增敏剂、促胰岛素分泌剂等几大类。DPP-4（Dipeptidyl Peptidase-4，二肽基肽酶）抑制剂通过选择性的抑制DPP-4，可以升高GLP-1和GIP的水平，进而调节血糖浓度。MH可以提高机体对胰岛素的利用，抑制肠道对葡萄糖的吸收，增加外周组织对葡萄糖的摄取和利用，从而降低血糖浓度，临床上广泛应用于II型糖尿病。本课题研制的SG/MH复方缓释片，其中MH为缓释部分，采用亲水凝胶骨架技术控制其释放；SG为速释部分，均匀地分散在MH缓释片外层衣膜中。随着糖尿病在全球发病率的逐年升高，降血糖药物市场销售额也持续增加，在2006到2010年期间，全球降血糖药物销售额保持了较高的增长势头，到达2010年时，全球销售额已经达 344.29 亿美元。艾美仕市场研究公司（IMS Health）预测，2015年降血糖药物全球销售额将达到430～480亿美元，仅次于抗肿瘤药物。DPP-4抑制剂作为新型降血糖药物，已经取得了优越的进展，市场份额逐年增加，逐渐成为主流的口服降血糖药物。而中国已经成糖尿病患者的第一大国，每年有1亿多人需要服用降血糖药物，而随着经济的高速发展，城镇一体化的加快，医疗体制改革的逐渐完善，也扩大了降血糖药物的需求。Resources日前发布的一份新报告，中国II型糖尿病治疗市场，将每年增长10%，预计2017年将达到35亿美元。目前，中国已经是继美国、日本之后的全球第三大II型糖尿病治疗市场。本课题拟将SG和MH制成复方缓释片，其中MH为缓释部分，SG为速释部分。制剂设计如下：内部为MH的缓释片芯，外面为两层包衣薄膜，从里到外分别为隔离层、含SG药物层。隔离层避免了药物之间的相互作用，提高了制剂的稳定性。课题以市售SG/MH复方缓释片（KOMBIGLYZE XR，百时美施贵宝公司）为参比制剂，通过单因素考察和正交试验进行处方筛选与优化，使自制制剂和参比制剂的体外释药行为达到相似。课题以Beagle犬为试验动物，采用双周期双交叉给药方案，通过LC-MS/MS法同时测定SG和MH的血药浓度，研究自制制剂和参比制剂（KOMBIGLYZE XR）在动物体内的药动学特征，并对结果进行统计分析和评价，证明自制制剂与参比制剂具有生物等效性以及MH在体内具有缓释效果。复方SG/MH缓释片在中国尚没有企业申报，通过本课题研究，为患者提供一种更为安全有效的新制剂，提高病人的顺应性，填补国内空白，降低国内患者用药水平，推动我国新型释药系统的发展，推动我国制药工业的迅速发展。
二、实验方法：
本课题以自制SG/MH复方缓释片为受试制剂，以市售SG/MH复方缓释片为参比制剂，采用双周期双交叉给药方案，将4只Beagle犬随机分为两组，每组2只，一组给予参比制剂，一组给予受试制剂，经过一周的清洗期后，交叉给药，剂量为每只犬每次服用一片（规格为：SG/MH复方缓释片，5/1000mg）。服药前禁食12h，于口服给药前及给药后15、30、45min和1、1.5、2、3、4、6、8、12、18、24、36、48h，取上肢静脉血3mL，置经肝素处理的试管中，离心分离血浆，于-70℃冰箱中保存直至分析。同时还要建立合适的测定方法，并对方法进行考察，包括血浆样品处理方法、样品测定方法、标准曲线的制备、专属性试验、回收率、精密度实验等。
三、评价方法
按照双周期双交叉给药方案，考察了两种制剂在Beagle犬体内的药动学特征；建立了LC-MS-MS方法测定Beagle犬体内血浆药物浓度。计算两种制剂的生物等效性；生物等效性是指一种药物的不同制剂在相同的实验条件下，给予相同剂量，其吸收程度和吸收速率没有明显差异。通常制剂生物等效的标准为：供试制剂与参比制剂的AUC0-tau;对数比值的90%可信限在80%~125%置信区间内；供试制剂与参比制剂的Cmax对数比值的90%可信限在70%~143%置信区间内；供试制剂与参比制剂的AUC0-tau;、Cmax的双向单侧t检验均得到Plt;0.05的结果，t1ge;t1-alpha;(v)与t2ge;t1-alpha;(v)同时成立；Tmax经非参数法检验无差异，则供试制剂与参比制剂具有生物等效性，供试制剂与参比制剂为生物等效制剂。
四、实验试剂及仪器
试验仪器有AB SCIEX QTRAP 5500，Analyst 1.5.2样品分析系统，分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司），SPD 2010真空浓缩仪（Thermo Electron Corporation），Beckman Cmu;lter J-E冷冻离心机（美国贝克曼库尔特有限公司），80-2台式低速离心机（上海医疗器械（集团）有限公司手术器械厂），KQ5200超声波清洗器（昆山市超声波仪器有限公司），Milli-Q Gradient纯水器（美国Millipore）涡旋混合器（上海沪西分析仪器厂），数显恒温水浴锅 HH-4（国华电器有限公司），LEGEND Micro21R离心机（Thermo Scientific）。试验试剂有：受试制剂：SG/MH复方缓释片（自制，批号：20140227），参比制剂：市售SG/MH复方缓释片KOMBIGLYZE XR（美国Bristol-Myers Squibb，SG/MH，5/1000mg），MH标准品（中国药品生物制品检定所，100mg，批号：22FA-5YGN），SG标准品（江苏威凯尔医药科技有限公司，批号：65-10-461-9HPC，含量99.9%），MH标准品（中国药品生物制品检定所，100mg，批号：22FA-5YGN，含量100.00%），内标物：DDB（石斛碱，中国药品生物制品检定所，批号：8MXX-THCW，含量ge;99.4%），内标物：MOR（吗啉胍，中国药品生物制品检定所，批号：100483-200402 ，含量99.99%）。
