开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
拟研究的问题：中药小红参为茜草科茜草属植物紫参（Rubia yunnanensis (Franch.) Diels）的根及根茎，具有重要的药用和商业价值。据《中国药典》（2015版）“茜草”药材分类下记载，茜草类药材具有凉血、祛瘀、止血、通经的作用[1]。现代药理研究则表明小红参具有抗肿瘤、升高白细胞、免疫调节、抗炎、抗风湿、抗心肌缺血、抗氧化等活性，可作为茜草的代用品。小红参所含的化学成分已发现有近百种，主要包括醌类、乔木烷型三萜以及茜草属植物所特有的茜草科类型环肽。其中，萘醌二聚体因其骨架多变和潜在的抗肿瘤活性，近年来备受人们关注。本课题拟选择中药小红参为研究对象，重点关注其甲醇提取物氯仿部位中萘醌二聚体类成分，以期待发现新的萘醌二聚体。
采用的研究手段：小红参的根及根茎经干燥、粉碎后，利用甲醇热回流提取3-4次，每次时间为2-4小时，提取液经减压浓缩得甲醇浸膏；甲醇浸膏经硅胶柱层析，以氯仿/甲醇系统梯度洗脱，获得氯仿部位浸膏。所在课题组前期已完成该部分工作。本课题拟选用的材料为上述小红参甲醇提取物中氯仿部位，拟采用的方法为使用已经建立的小红参LC-MS分析方法对氯仿部位进行化学成分的数据分析和处理，并利用MDF模型分析其中的新化学成分，并重点关注萘醌二聚体。根据所得结果，结合LC-MS的一级/二级分析的新策略，进一步定向分离新的萘醌二聚体。
文献综述：
1. 茜草属植物化学成分研究概况
茜草科（Rubiaceae）茜草属（Rubia）植物分布于全世界各地，现研究已发现70多种，分布地有欧洲大陆西部和北部地区、非洲南部地区、美洲热带地区、亚洲温带地区以及喜马拉雅山脉处。在我国，茜草属植物分布广泛，主要分布在云南省、四川省、新疆和西藏等地，共有36个种和2个变种，这其中有20个种为我国的特有种[2]。根据史料记载，茜草属植物作为药物，已在我国使用了几百年，因而其有着不言而喻的药用价值。除此之外，茜草属植物还有着作为染料而产生的经济价值。如今，《中国药典》药材与饮片类中，仍收载有茜草。该属包含多种植物，如西藏茜草（Rubia tibetica）、小红参（R. yunnanensis）、金线草（Rubia membranacea Diels）等，这些植物在我国多个地区作为茜草代用品使用，主要用于治疗吐血、衄血，崩漏，外伤出血，经闭瘀阻，关节痹痛，跌扑肿痛等[1]。
近年来，已有很多学者对多种茜草属植物进行化学成分研究，进而研究其所含的主要成分和对应的药理作用，尝试以现代药理学的理论解释和发展传统中药。根据研究表明，茜草属植物所含的化学成分繁杂、种类较多，但普遍存在的成分有醌类、萜类、肽类、茜草素、茜草酸等。其中，脂溶性的蒽醌类和萘醌类化合物含量最高，现已发现了100多种蒽醌及其衍生物和60多种萘醌及其衍生物。如1983年，Itokawa等从茜草的苯提取液中分离出醌类化合物大叶茜草素[3]；又如我国学者从茜草属植物中开发出药物升白药茜草双酯（1, 4-萘酚-2, 3-二羧酸二乙酯）[4]，其可用于各种原因引起的白细胞减少。除此之外，醌类化合物还有着抗菌、抗肿瘤、抗氧化和止血等作用。除醌类化合物之外，茜草属植物中萜类化合物含量也较高，最早从中药茜草中分离出来的萜类化合为茜草叶酸和茜草香豆酸[5]。
- 茜草属植物中醌类成分的研究
现已有多项研究表明茜草属植物中含有多种多样的醌类化合物，并揭示了它们的活性。研究表明，醌类化合物可以通过抑制DNA拓扑异构酶的活性而起到抗肿瘤的作用：Jeong等用乙酸乙酯提取茜草根部，分离出的多种新醌类化合物对DNA拓扑异构酶Ⅰ、拓扑异构酶Ⅱ均有显著的抑制作用，这其中又有两种化合物对肺癌细胞A549、卵巢癌细胞SK‑OV‑3、人结肠癌细胞HT29和人肝癌细胞HepG2有弱细胞毒性[6]。此外，醌类化合物还能起到抑制肿瘤转移的作用[7]。除了抗肿瘤作用外，研究还表明茜草属植物中分离出的醌类化合物有抗炎、抗菌和抗血栓等作用。Mishchenko等通过测定血浆中的LPO产物的含量，证实分离出的七种醌类化合物可以抑制体内氧化剂的活性，从而起到抗炎的作用[8]。醌类化合物对细菌和真菌均有一定的抑制作用：Li等用圆盘扩散法测试了分离出的两个醌类化合物的抗菌活性，结果显示这两种化合物均可以抑制革兰氏阳性的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌及粪链球菌的活性[9]；Fan等则使用比浊法证实部分醌类还有着抑制真菌的活性[10]。另外，Golcu等的研究表明，从茜草属植物中分离出的醌类化合物mollugin、xanthopurpurin和rubiquinone均对可以通过抑制血小板聚集而起到抗血栓的作用[11]。
- 总结和展望
茜草属植物是我国的传统中药，其在历代医书中均有记载。近年来，通过现代药理学研究，我们已经揭示了茜草属植物产生药效的原理，并期待可以从该类植物中分离出更多的新型活性化合物，从而进一步发展传统中医药。本课题选用茜草属植物小红参的提取物作为研究对象，借助多种色谱、光谱分析方法，对小红参提取物中的新萘醌二聚体进行分析、分离和鉴定，以期待发现新的高抗肿瘤活性的萘醌二聚体化合物。
参考文献
