利拉鲁肽多克隆抗体的制备
[研究的主要目的和意义]
利拉鲁肽（英文名称为Liraglutide）是一种人胰高糖素样多肽-1(GLP-1)的类似物，是一种新型的2型糖尿病治疗药物。利拉鲁肽可以根据体内葡萄糖水平的高低按需调节降糖激素的分泌，同时具有优异的降糖效果和极低的低血糖风险，并能够降低体重，改善beta;细胞功能，降低血压和血脂，显示出了延缓糖尿病进展及减少糖尿病心血管并发症发生的潜力。GLP-1受体为天然GLP-1的靶点，GLP-1是一种内源性肠促胰岛素激素，能够促进胰腺beta;细胞葡萄糖浓度依赖性地分泌胰岛素。利拉鲁肽的药理学作用是其作为一种GLP-1类似物，与人GLP-1具有97%的序列同源性，人GLP-1可以结合并激活GLP-1受体。利拉鲁肽通过在天然GLP-1分子结构中更换一个氨基酸( 34 位赖氨酸被精氨酸取代)，并于第26 位赖氨酸上增加了一个由谷氨酸介导的16 碳棕榈脂肪酸侧链，它与天然GLP-1 有97%同源性，从而保留天然GLP-1 功效的同时克服了易被DPP-4降解的缺点。这是利拉鲁肽半衰期(t1/2) 长达13 h( 10－14 h) 的分子基础。利拉鲁肽于2009年7月，在欧盟上市；2010年1月，在日本上市；2010年1月25日，美国食品药品监督管理局（FDA）批准利拉鲁肽在美国上市；2011年4月13日，获中国国家食品药品监督管理局批准，用于治疗成人2型糖尿病，2011年10月9日，正式在中国上市。随着该药的热销以及专利的期限将至，国内多家药企对该药进行仿制。在此过程中对仿制药物进行药代动力学、毒代动力学评估是一项必须完成的任务。本实验拟制备滴度高，特异性强的抗体，为建立灵敏准确的ELISA方法奠定基础。
[拟研究或解决的问题]
1.了解利拉鲁肽的基本知识。
2.掌握利拉鲁肽多克隆抗体的制备的基本原理及其操作步骤。
3.熟悉ELISA的实验原理、操作流程和结果判断。
4.获取滴度高特异性强的多克隆抗体。
[采用的研究手段]
本研究拟采用利拉鲁肽偶联KLH蛋白免疫新西兰大白兔制备利拉鲁肽多克隆抗体。
