开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
课题背景：
据世界卫生组织国际癌症研究中心(International Agency for Research on Cancer，IARC)统计，2008年全球女性乳腺癌新发病例达138万[1]。Jemal 等人[2]对全球恶性肿瘤的统计结果显示：乳腺癌以 23%的发病率位居于女性恶性肿瘤发病之首，在因女性恶性肿瘤致死的比例达到了14%。乳腺癌的高发病率和高致死率严重威胁着女性的身体健康。因此乳腺癌的预防及治疗具有重大的社会价值。
《中华本草》记载盐角草( S． europaea) 具有平肝、利尿、降压的作用，主治高血压和头痛，新疆地区也用作抗坏血剂和利尿剂；在韩国，S． Herbacea 民间用于治疗便秘、肥胖、糖尿病和癌症，近年来研究发现其具有抗氧化、抗炎、免疫调节、降血糖及其降血脂的功能;；在印度，S． brachiata 用于治疗疥癣和皮肤瘙痒。目前，从盐角草中分离得到的化合物主要有黄酮、萜类、多糖、生物碱等，其中有些部位的提取物及其相应的单体化合物具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、免疫调节、降糖降血脂等生物活性[3]。
北美海蓬子(Salicornia bigelovii Torr.)为藜科(Chenopodiaceae)北美海蓬子属(Salicornia L.)一年生植物，生于盐碱地、盐湖旁及海边，可直接使用海水灌溉。北美海蓬子种子中含油量约30%，其中不饱和脂肪酸含量可达90%；研究表明其富含皂苷，具有压降脂、减肥的作用，可作为有机蔬菜、保健食品的原料[4]。
SL-15是从北美海蓬子全草中提取分离得到的一类降齐墩果烷型三萜皂苷化合物，对MCF-7细胞具有明显抑制生长和诱导细胞凋亡作用。经过SL-15处理MCF-7细胞后，会引起细胞形态皱缩变圆，与周围细胞分离。研究发现:信号转导和转录活化因子(signal transducers and activators of transcription , STATs)家族是一种存在于胞浆并在激活后能够转入核内与DNA 结合的蛋白家族, 具有信号转导和转录调控双重功能。STATs 蛋白广泛表达于机体不同类型的细胞和组织中, 参与细胞生长、分化、凋亡等多种生理功能的调控, 并与炎症、肿瘤和免疫反应关系密切，其中STAT3 与肿瘤的关系最为密切[5],参与多种肿瘤的致癌信号通路和胞内信号转导通路，并可以被多个促炎因子和生长因子活化[6]。在正常生理状态下, STAT3 的激活是快速而短暂的, 仅维持几分钟到几小时, 这对于正常细胞的生理功能起着关键性作用, 而STAT3 持续性激活则可诱导与细胞增殖、分化、凋亡密切相关的一系列基因的异常高表达, 通过多种途径促进细胞增殖、恶性转化、阻碍细胞凋亡, 表现出强烈的致癌作用[7]。ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ 通路在肿瘤细胞增殖、血管新生和转移以及对放化疗的拮抗中起重要作用，其在乳腺癌中经常被激活，且此通路中多个分子的抑制剂都能抑制乳腺癌细胞的增长、引起癌细胞的凋亡，在乳腺癌的靶向治疗中发挥重要作用[8]。
本实验主要对SL-15体外诱导肿瘤细胞凋亡的作用及其机制进行探讨研究，以期寻找其作用的潜在靶点和分子机理，从而为抗乳腺瘤新药的研制提供一定的科学依据，拟采用MTT法测定肿瘤细胞的体外增殖作用[4]，通过western blot法检测SL-15对mTOR通路中mTOR、p-mTOR、p-P70S6K（Ser，Thr）和p-4EBP1检测。
实验流程：
- MTT检测SL-15对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒作用
取处于对数生长期的肿瘤细胞，铺于96孔培养板中，每孔100 mu;L，接种密度2times;105个/ml，培养过夜后分别用不同浓度的SL-15处理，每个浓度重复3孔，37 ℃、含5% CO2的培养箱中孵育。24 h后，向各孔中加10 mu;L MTT(5 mg/mL，PBS)，置于培养箱中继续孵育，4 h后，倒去培养液，每孔中加入100 mu;L DMSO，避光振摇10min，用酶标仪在波长为570 nm的条件下测定每孔的吸光值并计算细胞生长抑制率。
- 用Western检测STAT3信号通路
2.1 细胞总蛋白的提取
