开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、研究背景及意义
呼吸道感染:上呼吸道感染是指自鼻腔至喉部之间的急性炎症的总称,是最常见的感染性疾病。90%左右由病毒引起,细菌感染常继发于病毒感染之后。该病四季、任何年龄均可发病,通过含有病毒的飞沫、雾滴,或经污染的用具进行传播。其中儿童呼吸道感染中致病菌主要为革兰阳性菌51.05%,以肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌为主;革兰阴性菌48.95%,以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌为主[1]。老年人呼吸道感染致病菌主要以革兰氏阴性杆菌为主(68.9%),其次为革兰氏阳性菌(20.4%)和真菌(10.7%),其中革兰氏阴性菌以铜绿假单胞菌、不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、肺炎克雷伯菌为主[2]。
细菌耐药性:1928年Fleming发现了青霉素,1941年投入临床使用,但仅仅两年之后即出现了产青霉素酶的葡萄球菌。自此以后种类繁多的抗菌药物不断问世,使细菌感染性疾病的死亡率大幅度降低,但是与此同时细菌耐药也成为医学界必须面临的严峻挑战。至本世纪感染性疾病的死亡率在世界范围内仍位居第二位[3],新的感染性疾病在不断出现,既往我们已认识的细菌以新的耐药形式出现,并且具有更强的毒力。细菌耐药仍然是威胁人类健康的重要医学问题,仅仅依靠抗菌药物开发战胜细菌的威胁是远远不够的。在张锐和杨再国的研究分析中得知,2007年呼吸道感染菌前7位是:克雷伯菌30.9%,假单胞菌18.8%,大肠埃希菌12.1%,阴沟肠杆菌9.1%,不动杆菌7.3%,金黄色葡萄球菌6.1%和表皮葡萄球菌5.5%;2008年呼吸道感染菌前7位是:假单胞菌30.6%,克雷伯菌15.0%,念珠菌12.1%,不动杆菌10.7%,表皮葡萄球菌9.7%,大肠埃希菌9.7%和金黄色葡萄球菌3.4%.所有细菌对临床常用抗生素的耐药率都在增加,最高增加达24%,机会致病细菌引起呼吸道感染增多,对临床常用抗生素的耐药性增高,因此开发更多廉价而有效的抗菌药物迫在眉睫[4]。中药单体药效良好、作用温和、不良反应少,可研究的空间还很大,越来越成为药界科研人员的研究热点。
二、研究内容和目的
此次实验研究计划对中药单体T79-01抗呼吸道感染进行体外活性研究,先后进行打孔法定性测定和琼脂二倍稀释法(测MIC)定量测定,从而对该中药单体进行客观的评价,为其今后的临床实验研究提供参考数据。
二、研究方案
本研究拟先后采用打孔法进行初步抗菌强度评定,再用琼脂稀释法测定致病菌的体外最低抑菌浓度(MIC)。
1.打孔法定性测定:
(1)实验材料的准备
