HDAC9通过调控HNF4a参与HBV转录文献综述

 2022-12-27 10:12

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

一、拟研究问题:

乙型肝炎病毒(HBV)感染是危害人类健康重大疾病之一,HBV感染极易形成慢性化,进而发展为肝硬化、肝癌等。目前还没有能够彻底治愈HBV的特效药,宿主与HBV的生活周期调控之间的相互作用还有许多待研究的方向,宿主与HBV的相互作用研究将为抗乙肝药物研发提供新的思路。本课题将研究组蛋白去乙酰化酶9( HDAC9)调控HBV生活周期的详细分子机制,为HBV药物研发提供新靶点。

二、实验内容:

1、通过慢病毒感染方法在HepG2.215/Huh7细胞上过表达HDAC9,检测HBV相关指标(HBeAg、HBsAg、pg RNA、ccc DNA),确定过表达HDAC9对HBV复制的影响。

2、在HepG2.215/Huh7细胞上感染沉默HDAC9慢病毒,检测HBV相关指标(HBeAg、HBsAg、pg RNA、ccc DNA),确定沉默HDAC9对HBV复制的影响。

3、选取给药HDAC9抑制剂来检测抑制HDAC9活性对HBV生活周期的影响,检测指标有(HBeAg、HBsAg、total RNA、pg RNA、ccc DNA)。

4、针对病毒感染的不同复制阶段,对病毒本身吸附、侵入阶段以及在宿主细胞内的复制过程中所有靶点,采用qPCR、Western Blot、双荧光素报告实验等检测方法,研究HDAC9对HBV在基因转录(mRNA)、蛋白表达和宿主相关因子表达水平的影响,探讨HDAC9抗乙型肝炎病毒的靶点和作用机制。

三、实验方法

1、HDAC9对HBV的影响

实验在2种细胞模型(HepG2 2.215细胞和Huh7细胞)上分别进行,该两种细胞分别用于稳转和顺转HBV。利用293T细胞慢病毒包装,分别检测过表达、沉默HDAC9及HDAC9抑制剂(TMP269)对HBV各指标(pgRNA、total mRNA、core-associated DNA、cccDNA、上清中HBsAg、HBeAg及蛋白水平)影响水平。

剩余内容已隐藏,您需要先支付 10元 才能查看该篇文章全部内容!立即支付

发小红书推广免费获取该资料资格。点击链接进入获取推广文案即可: Ai一键组稿 | 降AI率 | 降重复率 | 论文一键排版