一、课题解决的问题 探究药物对L02细胞的作用
目的意义:肝脏是人体最重要的新陈代谢器官。肝病患者由于其肝脏长期受到病毒的侵害,肝功能遭受破坏,从而引起一系列新陈代谢障碍。但肝病的危害绝不仅仅限于肝脏本身,它还可以引起其他多种疾病[1]。l02细胞已经经过被研究,相关理论实践较成熟,应用此细胞进行相关研究,可以得到良好的效果,达到观察药物作用的目的,同时可以在此过程中改进药物或者培养模型,有利于以后后续相关药物的实验开发,具有一定的引导作用。
二、研究方法和技术路线
1:准备工作,准备仪器药品,并对其进行清洗灭菌,准备相关培养条件如配制培养溶液和所需药物等。学习相关技术,掌握相关步骤的原理和操作方法。注意人身安全。
2:细胞培养,学习细胞培养技术,了解细胞培养注意事项,学习有关仪器的使用方法等。
培养可用于实验符合要求的细胞,实验中常用培养基为正常 L-02 肝细胞采用 RMPI-1640 完全培养基(10 %胎牛血清、100 U/ ml 青霉素和 100 mu;g/ ml 链霉素) ,置37 ℃、5 % CO2细胞培养箱中进行培养,可以以此作为参照进行调整。
3:待细胞生长状态良好后进行点板,分别使用不同浓度梯度的药物和参照药物等作用于细胞,作用一定时间后,采用MTT法进行检测,观察药物对肝细胞的作用。留意培养过程中的问题和注意事项,如防止感染杂菌等。定期观察检测培养基中细胞生活状况的变化,记录指标。
4:对实验数据进行处理并评价药物对肝细胞的作用。MTT方法是以细胞的存活率作为指标,检测用药对细胞的影响。学习检测方法的原理和操作。当细胞存活率与对照组有显著性差异时表示其对肝细胞存在促进或抑制作用。
三、论文课题研究进度安排
2014年3月04日----3月10日 确定选题,查阅文献。
