一、课题解决的问题
随着社会的发展以及生活水平的提高，不健康的饮食方式导致糖尿病的发病率逐渐上升，相应的人们也越来越致力于研究治疗糖尿病的药物。糖尿病是一种常见的内分泌系统疾病，是由于体内的一种激素胰岛素的绝对缺乏或相对不足，或是该物质本身质量及其他原因造成不能发挥正常生理作用，而引起的以糖代谢为主的糖、脂肪、蛋白质三大物质的代谢混乱的一种综合病症。1999年9月世界卫生组织（WHO）颁布的糖尿病诊断标准为：有三多一少（多饮、多食、多尿、体重减轻）糖尿病症状，且符合以下三条之一者，即可诊断为糖尿病。2型糖尿病是一种慢性进行性糖尿病疾病，为非胰岛素依赖型（成年型），发病年龄多在40岁以上，并常伴有肥胖，患者体内胰岛素分泌的数量并不少，但效应差。平时不用胰岛素治疗，也不会出现酮症酸中毒。发病缓慢，三多一少症状多不明显，只是在治疗其它疾病时才被发现，目前不能被治愈，但是可以通过良好地治疗以达到延缓甚至是避免一些过去认为不可避免的不良症状。糖尿病常用治疗药物有口服降糖化学药和胰岛素，本次课题主要分析的是口服降糖类药物瑞格列奈片的方法学验证。
瑞格列奈片为非磺酰脲类促胰岛素分泌剂, 用于饮食控制及运动锻炼不能有效控制高血糖的2型糖尿病（非胰岛素依赖性）患者，瑞格列奈与胰岛beta;细胞膜上的特异性受体结合，促进与受体偶联的ATP敏感性钾通道关闭，抑制钾离子从beta;细胞外流，细胞膜去极化，钙通道开放，钙离子内流，促进胰岛素分泌。其作用快于磺酰脲类，故餐后降血糖作用较快。为第一个进餐时服用的葡萄糖调节药。最大的优点是可以模仿胰岛素的生理性分泌，由此有效的控制餐后高血糖，且不引起严重的低血糖，不引起肝脏的损害，有中度肝脏及肾脏损害的患者对该药也有很好的耐受性，药物相互作用较少。同时瑞格列奈片可与二甲双胍合同。与各自单独使用相比，二者合用对控制血糖有协同作用。由此可见瑞格列奈片作为胰岛素促泌剂的一类在2型糖尿病治疗中占有重要地位。伴随着老年糖尿病的高发，治疗糖尿病药物的瑞格列奈片在这一疾病上的广泛使用，许多药企相继的对其进行研究和生产。为了保证药品出厂后的效用，在出厂前都会对药品进行质量分析，而对于其质量分析方法的验证已是企业的把关口。
方法学验证是对测定方法的评价,是建立新方法的研究内容和依据。验证过程的目的是为了考察该方法，并确定运行该方法时条件变化的允许程度，在方法的验证过程中，考察的内容应包含该方法的全部详细步骤。色谱分析方法验证内容有：准确度、精密度、线性及线性范围、检测限和定量限、专属性、耐用性、稳定性、系统适用性实验。瑞格列奈片的方法学验证，主要是针对瑞格列奈片在鉴别、溶出度、有关物质、左旋异构体及含量测定五个检验项目进行方法学确认。本方法学确认涉及精密度（方法及进样精密度）、专属性。
通过实验分析确认该分析方法是否适用于瑞格列奈片的鉴别、溶出度、有关物质、左旋异构体及含量测定的检验。
二、方法和技术路线
主要运用高效液相色谱法和紫外分光光度法对各个项目进行分析验证。
（1）高效液相色谱法：高效液相层析仪根据各种各样的化工互作用力来分离混合物。这种互作用力通常是分析物及分析管柱之间的一种非共价性质。使用高效液相色谱时，液体待检测物在不同的时间被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，每个峰顶都代表一个另外化合物的种类，最后通过分析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。验证的内容有准确度、精密度、专属性和系统适用性实验。
（2）紫外分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长（频率小）的光线能量小，波长短（频率大）的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
