开题报告
一、研究目的
肠道病毒71型是肠道病毒的一种，简称为EV71，常引起儿童手足口病、病毒性咽峡炎，重症患儿可出现心肌炎、肺水肿、脑炎等，统称为肠道病毒EV71感染疾病。该病多发生于儿童，尤其是3岁以下婴幼儿多发，少数病情较重，严重的会引起死亡。
3C蛋白酶是催化小RNA病毒前体蛋白中非结构蛋白部分裂解的关键蛋白酶，对病毒的复制有着重要作用，是当前抗病毒研究的一个重要靶点。EV71型3C蛋白酶具有自身特异的酶切特点，通过对其表达、纯化以及定量、活性的研究，建立起体外3C蛋白酶抑制剂筛选模型，为发现抗手足口病的药物奠定前期实验基础。
二、研究方法
利用IPTG诱导3C蛋白酶在大肠杆菌中表达，通过超声提取3C蛋白酶，用镍琼脂糖凝胶柱对3C蛋白酶进行纯化，用Bio-rad对蛋白进行定量，最后使用HRP、ABTS等试剂进行活性测定。
三、文献综述
摘要：肠道病毒EV71是肠道病毒的一种，简称为EV71，常引起儿童手足口病、病毒性咽峡炎，重症患儿可出现心肌炎、肺水肿、脑炎等，统称为肠道病毒EV71感染疾病。该病多发生于儿童，尤其是3岁以下婴幼儿多发，少数病情较重，严重的会引起死亡。3C蛋白酶是催化小RNA病毒前体蛋白中非结构蛋白部分裂解的关键蛋白酶，对病毒的复制有着重要作用，是当前抗病毒研究的一个重要靶点。EV71型3C蛋白酶具有自身特异的酶切特点，通过对其表达、纯化以及定量、活性的研究，建立起体外3C蛋白酶抑制剂筛选模型。为发现抗手足口病的药物奠定前期实验基础。
关键词：肠道病毒71型；3C蛋白酶；蛋白表达纯化；蛋白定量
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