:绞股蓝发根遗传转化体系的建立课题性质: radic;基础研究应用课题 设计型 调研综述 理论研究拟研究问题:利用发根农杆菌转化植物绞股蓝,产生生长迅速、生产效能高而稳定的毛状根培养物,为开发利用绞股蓝皂苷提供一个新的途径。
采用的研究手段:1.采用植物组织培养方法将绞股蓝的茎尖或茎段作为外植体,经适当的消毒处理,接种在不同激素配比的培养基上,诱导其愈伤组织、丛生芽的分化、快速培养出大量绞股蓝植物。
2.采用发根农杆菌介导绞股蓝的遗传转化。
3.采用叶绿体基因组序列对绞股蓝进行分子鉴定。
4.采用HPLC法测定绞股蓝中皂苷成分的含量。
论文课题研究进度安排:1.2021.03.01-2021.03.20 绞股蓝的组织培养2.2021.03.21-2021.04.15 绞股蓝发根的遗传转化3.2021.04.16-2021.05.15 绞股蓝发根的分子鉴定和含量测定4.2021.05.16-2021.06.10 撰写毕业论文并答辩文献综述:绞股蓝发根遗传转化体系的建立 绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum ( Thunb.) Makino)为葫芦科( Cucurbitaceae) 绞股蓝属( Gynostemma) 多年生攀缘草质藤本植物,又名七叶胆、甘茶蔓、七叶参等,分布于中国秦岭及长江以南地区,是江西省重点保护的濒危植物之一。
现代药理学研究表明,绞股蓝含有绞股蓝皂苷、多糖、黄酮类、氨基酸、微量元素等生物活性物质[1],具有促进细胞脂质代谢、调节人体生理机能、增强机体免疫力、改善心脑血管系统功能、调血压、降血脂、抗氧化、护肝、抗肿瘤等作用,对治疗和预防肿瘤复发转移、慢性消化系统疾病、冠心病、糖尿病等多种疾病有显著效果[2-6],是开发前景广阔的食两用植物[2-9]。
近年来,随着生态环境的日益恶化,加上野生绞股蓝近些年遭到过分开采,该资源濒临枯竭,为了解决供需矛盾,利用发根农杆菌转化植物绞股蓝,产生生长迅速、生产效能高而稳定的毛状根培养物,为开发利用绞股蓝皂苷提供一个新的途径。
1.绞股蓝植物组织培养1.1无菌材料的获得在晴好的天气采集新萌发的粗壮嫩枝,自来水冲洗干净后,在超净工作台内进行灭菌,灭菌后,将材料切成长1.5 ~ 2.0cm的带腋芽或顶芽的茎段,接入初代培养基中培养。
1.2初代培养将茎段接种到 MS 1.5mg/L 6-BA NAA 0.02mg/L的初代培养基上,10瓶/种,1- 3芽/瓶[10],观察记录诱导情况。
