抑制跨膜丝氨酸蛋白酶(TMPRSS2)活性中药的筛选文献综述

 2023-02-07 04:02

一、拟解决的问题:

中药是中华民族传统优秀文化之瑰宝,在数千年历史中为我国人民的健康做出了卓越贡献。在利用现代医学手段研究中药的过程中,我们仍因为中药的药物成分复杂、靶点和机制不清、难以质控等问题,在国际医药平台上步履艰辛。而当下,随着生物学和基因工程技术的发展,有学者提出利用基因重组技术,在细菌细胞壁表面表达出相关作用靶点,再利用垂钓技术将中药中的有效成分分离,最后一一验证各成分的药效。

中药有抗病毒类药物,但其对病毒的防治中活性成分暂不明确。TMPRSSs(跨膜丝氨酸蛋白酶)是一类定位于细胞膜上具有保守丝氨酸蛋白酶结构域的蛋白家族。本实验参考如上思路,探讨抑制跨膜丝氨酸蛋白酶(TMPRSS2)活性中药的筛选方法建立及应用研究。

二、采用的研究手段

1.酵母细胞的表面展示

酵母菌是真核生物, 具有折叠酶、分子伴侣、内质网等, 在蛋白质的折叠和分泌机制方面与高等哺乳动物相似, 基于此建立起来的酵母表面展示技术可用于展示糖基化和二硫键异构化等修饰的真核生物蛋白质[1]。酵母展示技术利用真核表达系统,对外源蛋白进行糖基化、加工和折叠等翻译后修饰,其最大优势是用于展示需内质网等细胞器特异的翻译后加工才能有效折叠和具有生物活性的哺乳动物细胞表面蛋白和分泌蛋白(如抗体 、细胞因子和受体等)[2]

2.垂钓技术及其在抗病毒中药活性成分筛选中的应用

在配体垂钓的研究领域,配体垂钓效果随着垂钓材料的发展不断进步革新[3]。配体垂钓 (ligand fishing) 技术能快速、高效地发现靶分子的高亲和性配体, 在辨识生物分子间相互作用和药物发现方面有着巨大的优势。其原理是基于大分子靶标与配体相结合,包括抗原-抗体、受体-配体、酶-抑制剂/激活剂和蛋白质-蛋白质的相互作用。

三、文献综述

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