绪论
骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种全身代谢性骨病,是由于多种原因导致的骨质量、骨密度降低、骨微结构破坏,骨脆性增加,从而致使骨折风险增大的疾病【1】。2018年10月国家卫生健康委员会发布的我国首个骨质疏松症流行病学调查结果显示,50岁以上人群骨质疏松症的患病率为19.2%,其中男性患病率为6.0%,女性患病率高达32.1%{2}。可见在中老年人群体,尤其是女性群体中发病率极高。且我国低骨密度人群数量庞大,是骨质疏松的高危人群。并且骨质疏松证的前期几乎没有临床表现。现有开发一种防治骨质疏松的中药药酒,符合中老年人饮食习惯,在日常生活中饮用可以减缓骨流失速度。
1.1 中药药酒
药酒同丸、膏、等剂型一样有悠久的历史。《汉书·食货志》中提到“酒百药之长。”中医认为酒性温味甘苦辛有毒人心、肝、肺、胃经。酒可饮用与药结合引药 入经、通经活络、温补阳气、祛寒止痛等更是理想的有机溶媒能溶解药物有效成分降低毒副作用【2】。中药药酒从使用途径上分有两种,一种为内服药酒,另一种为外用药酒。本实验研究中的研究对象为我校徐开俊教授主持研发一类新型药酒,该类药酒突破了传统药酒以酒浸泡中药材的方法,而直接选用人参、杜仲、枸杞、黄芪等药材,利用现代提取工艺与质量分析方法直接提取分离有效成分(如人参皂苷、黄芪多糖等),并将有效成分加入基酒中调配而成。具有组分确定、含量可测、质量稳定可控等优点。该药酒中的中药可起到疏风通络、活血化瘀、软化骨刺、消肿止痛及促进组织增生的作用,人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益气、生津安神的作用;杜仲可以补肝肾、强筋骨;枸杞具有养肝明目、延缓衰老的作用;黄芪补中益气、升血补脾。同时还有淫羊藿等中药,综合作用达到防治骨质疏松的良好作用。
1.2 杜仲
杜仲为被子门杜仲科(Eucommiaceae)杜仲属(Eucommia)植物杜仲(Eucommia ulmoides Olive.)的干燥树皮。《神农本草经》有记载,杜仲,味辛平。主腰脊痛,补中益精气,坚筋骨,强志,其质坚韧者,其精气必足,故亦能坚定人身之筋骨气血也。杜仲的化学成分极为丰富,含有木脂素类化合物、环烯醚萜类化合物、黄酮类化合物、苯丙素类化合物、萜类等【3】。其中绿原酸、京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷、杜仲苷、松脂醇二葡萄糖苷在药材提取过程中均被浸出。谢高倩【4】等人通过每日灌服大鼠松脂醇二葡萄糖苷并进行生物学检测和骨密度检测,实验结果表明松脂醇二葡萄糖苷有利于提高生长期大鼠骨密度、对骨微结构进行优化、增强骨强度、在促进骨形成的同时抑制骨吸收,提高大鼠的骨质量。吴思敏【5】以大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(ROBs)为研究对象,发现松脂醇二葡萄糖苷促骨活性显著,并可以增加成骨细胞形成的ALP染色阳性和钙化结节来促进骨形成。并且其能力在多种成分中作用显著。故松脂醇二葡萄糖苷是抗骨质疏松的主要成分,在含量过程中以松脂醇二葡萄糖苷作为指标来测定杜仲有效成分的含量。
1.3 拟解决的问题
现中药药酒中有效成分的含量测定以药典方法为主,但是在实际操作过程中发现目前现有的对药酒中所含主要成分的含量测定方法并不能准确测出有效物质含量,对后续上市工作造成影响。本实验研究以杜仲为例,试图优化有效成分松脂醇二葡萄糖苷的提取工艺和含量测定方法,为后续实验研究创造良好的实验条件。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
