尼克酰胺磷酸核糖转移酶激活小胶质细胞的构效研究
1、研究目的:
1.1、探讨NAMPT对小胶质细胞的激活作用——致炎
1.2、探讨NAMPT的致炎效应是否与其催化作用有关
2、研究内容:
2.1、小胶质细胞的培养 小胶质细胞含10%胎牛血清(FBS)的DMEM高糖培养基加青霉素100 units/ml、链霉素100 ug/ml, 置37℃ , 5% CO2的培养箱内培养。
2.2、NAMPT蛋白处理 用不同浓度的突变蛋白重组人NAMPT和NAMPT (H247A、R392E) 蛋白刺激小胶质细胞。
2.3、BV2细胞形态的观察 于显微镜下观察细胞形态是否变圆,判断BV2细胞处于静息态还是激活态。
2.4、TNF-alpha;、IL-6的测定 ELISA检测
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