课题背景：
糖皮质激素类物质属于甾体类化合物，外用糖皮质激素的基本化学结构式为氢化可的松结构。即含17个碳原子的环戊烷并多氢菲母核、C10和C13位上有甲基、C17位上有二碳侧链、C3位酮基和C4-C5位双键。在此基础上进行C1-C2位脱氢、C6-a位甲基化、C9-a位氟化、C11位羟基化等修饰后，构成一类应用范围不同、效果强弱不同的糖皮质激素类物质。[1]糖皮质激素，又名“肾上腺激素”，是由肾上腺分泌的一类甾体激素，其临床可用于一般抗生素或消炎药所不及的病症，如SARS、败血症等，还具有调节糖、脂肪和蛋白质的生物合成和代谢的作用，还具有抗炎作用，对于牛皮廯、湿疹、接触性皮炎，可局部外用于止痒和抗菌消炎。然而，长期使用糖皮质激素类抗菌剂或含微量痕量糖皮质激素的非甾体激素类抗菌剂，会导致严重的副作用：皮损皮疹扩大蔓延、脓包增多、炎症加重、溃疡面增大加深长期不愈、皮肤表面菌群失调、痤疮加重；还会给皮肤带来一系列的变化，如使表皮组织变薄、皮肤弹性变弱、皮纹消失以及皮肤的色素发生异常-黄褐斑样的色素沉着或者色素减退斑，还可表现为皮肤局部的多毛、干燥或鱼鳞病样变化。这一系列的变化尤以面部用药者表现较为明显，尤其是女性，因女性面部皮肤较薄，容易发生不良反应，而这些不良反应一旦发生，短期内很难改善，甚至有些反应是不可逆的，因此，在日常用抗菌剂时，对于糖皮质激素类药物用量因当严格控制，尤其对于非甾体激素类抗菌剂，其应当不含或严格控制糖皮质激素类物质的含量。
2009年，国家质量监督检验检疫总局发布了《化妆品中四十一种糖皮质激素的测定-液相色谱串联质谱法和薄层层析法》作为控制化妆品中糖皮质激素类物质的国家标准；同年，国家卫生部办公厅印发了《消毒产品中糖皮质激素测定-液相色谱-串联质谱法》等检测方法的通知，规定了6种糖皮质激素的检测方法，用以监督控制消毒产品中糖皮质激素的含量。
课题目的及意义：
当今时代，质谱已成为分析痕量物质必不可少的手段，本课题拟用UHPLC串联三重四级杆质谱仪来定性定量抗菌剂中糖皮质激素类物质。现多以外标法建立定量方法并进行方法学验证，而本课题拟用内标法[3]建立定量方法并验证方法学内容并与外标法[1-2]相比较，用以检测此抗菌剂中是否含有非法添加的糖皮质激素。
课题内容：
1.调谐：将所测糖皮质激素类物质的对照品混合在一起，配成约100ng/ml的混标溶液，并进行质谱检测器的调谐，使得此混标溶液的综合响应值达到最佳。
2.供试品溶液制备：取本品约0.2 g，精密称定，于15ml具塞塑料离心管中，加入3 ml饱和氯化钠溶液，于涡旋混合器上混合使样品分散，准确加入2ml乙腈，充分涡旋提取2 min，5000 r/min离心10 min，吸取上层清液于另一50 ml具塞塑料离心管中，下层氯化钠溶液用2 ml乙腈重复提取步骤一次，合并二次乙腈提取液，往提取液中准确加入40 ml高纯水，混匀，加入10%亚铁氰化钾溶液[称取115gK4Fe(CN)6·3H20固体，用水溶解定容至1L] 0.2 ml，混匀，加入20%乙酸锌溶液[称取239gC4H6O4Zn·2H20固体，用水溶解定容至1L] 0.2 ml，混匀，5000 r/min离心10 min，清液待进行固相萃取小柱净化。
Waters Oasis reg; HLB 固相萃取小柱（3cc）接上固相萃取装置，依次用5ml甲醇、10ml水进行活化。待用。
小柱上端紧密连接一20ml垫有定量滤纸的磨口漏斗，将待净化的供试品清液倒入漏斗，经滤纸过滤后流经小柱，待供试品清液自然流尽后，用10%乙腈水溶液10 ml清洗小柱，待清洗液自然流尽后，取下漏斗，用吸球吹出小柱中残留液。在柱出口处接一15 ml具塞塑料离心管，用4 ml甲醇淋洗小柱，待甲醇自然流尽后，用吸球吹出小柱中残留液。取下离心管，用甲醇定容至5 ml，经12000 r/min离心10 min，取清液进样。
