原发性痛经是最为常见的一种妇科病,在中、西医学上均有众多资料研究。通过分析查阅原发性痛经主要影响因素,参考古今学者部分文献对原发性痛经的机理进行简单综述,可为研究原发性痛经的机理环节提供一些理论帮助和指导。本课题前期研究发现葛根汤能抑制缩宫素诱导的雌激素同步化原发性痛经模型小鼠子宫痉挛性收缩。现设计实验旨在探讨葛根作为葛根汤中的君药成分抑制原发性痛经模型小鼠子宫痉挛性收缩的调节作用。
采用的方法:
体内研究:
1.行为学实验
通过将72只ICR洁净小鼠随机分为空白组、雌激素组、模型组、葛根汤组、葛根汤-去葛根组、葛根组、布洛芬组7组,对相应组别小鼠给予周期性定量的苯甲酸雌二醇腹腔注射和药物灌胃。之后以注射缩宫素来模拟痛经模型小鼠,在暗箱里观察记录小鼠的扭体抑制率以及潜伏期。
体外研究:采用离体实验,检测葛根汤,葛根汤-葛根,葛根对原发性痛经模型小鼠离体子宫收缩活力的调节作用。
1.Elisa检测血清中前列腺素PGF2alpha;的水平
对分组小鼠进行眼球取血,取得血清样品在3500r,常温的条件下离心15min,取上层清液,按PGF2alpha; Elisa试剂盒说明书检测各组小鼠血清中PGF2alpha;含量差异。
2.Western blotting检测COX-2的表达水平
脱颈椎处死小鼠,取各组中小鼠子宫组织加入蛋白裂解液将其匀浆、离心制成蛋白样品,后根据Western blotting实验步骤操作,检测COX-2的表达水平。
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