1、拟研究的问题:1)研究大肠杆菌发酵培养基的最佳配比2)通过实验验证大肠杆菌发酵培养基的最佳组成2、采用的研究手段:1)查阅国内外文献,收集相关资料,确定培养基各组成大致范围2)通过预实验探究实验的可行性2)通过正交实验确定大肠杆菌发酵培养基最佳组成3、文献综述:肝素,一种数十年来最广泛用于抗凝血药物的物质,是一种天然粘多糖,一种成分混杂的多分散的混合物。
其根据平均分子质量被归类于三种类型:未分段肝素(UFH)、低分子量肝素(LMWH)、极低分子量肝素(ULMWH)。
UFH目前从动物组织(如猪肠和牛肺牛肠)中取得。
LMWH只能经由化学或酶进行UFH解聚反应获得,但是两者都会引起糖单元结构的改变。
肝素的抗凝血活性与其分子量的大小密切相关,一般以低分子量效果较好。
同时,肝素还具有抗肿瘤、抗炎等作用,是一种重要的糖胺聚糖类生化药物。
目前临床使用的肝素大多事从动物组织中提取制备而来,但由于其提取成本高、易受原组织中病菌污染等问题,如疯牛病的影响使人们对使用动物来源的肝素产生了恐惧,特别是自 2007 年以来的多次肝素污染事件更使人们对动物来源的肝素产生了恐慌,人们开始寻求新的肝素来源。
因此,现在通过生物发酵法生产肝素越来越受到重视。
Heparosan是大肠杆菌K5的荚膜多糖,具有与肝素相似的碳水化合物骨架,其分子结构为一种重复二糖的链状结构,并且与未被修饰的UFH具有相似的结构,可以在化学酶法合成中作为肝素和硫酸化类肝素的前体。
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