一、背景知识IPF(特发性肺纤维化)是指原因不明、以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱、最终导致肺间质纤维化为特征的疾病。
肺泡上皮细胞损伤和异常修复是导致肺纤维化的主要机制,损伤发生后,修复过程中不能完成正常的再上皮化过程,进而导致肺泡-毛细血管损伤。
这一过程诱发细胞因子产生,成纤维细胞表面表达细胞因子受体,在细胞因子作用下聚集到损伤部位并增殖[1]。
临床上以进行性呼吸困难、限制性通气功能障碍和弥散功能降低为特征[2]。
外泌体(exosome)是多种活细胞经过内吞融合外排等一系列过程主动向胞外分泌的直径为30~150 nm的双层膜结构细胞外囊泡(EVs),广泛存在于血液、尿液和唾液等生物体液中,并通常作为细胞间胞质蛋白、核酸和脂质的转移载体发挥运输调控作用,被认为是细胞间通讯的核心部分[3],能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能,如免疫中递呈抗原、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等。
外泌体具有脂质双层膜结构,能很好的保护其包被的物质,且能靶向特定细胞或组织,因此是一种很好靶向给药系统。
目前,体液来源外泌体分离有6种常用方法:超速离心法、沉淀法、分子筛色谱层析法、密度梯度离心法、膜超滤法、膜特异性吸附法[4]。
对于血清/血浆中外泌体,分子筛层析法是效果较好的分离方法。
利用多孔介质对不同大小、体积和形状分子排阻能力的不同,使得分子在凝胶固相介质中流动的时间不同,较大的囊泡先被洗脱出来,较小的蛋白质等物质后被洗脱出来。
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