研究课题：L-01蛋白的构建及表达条件的优化
L-01是一种钙镁离子依赖的胞外核苷酸水解酶。它在许多恶性肿瘤中的表达水平升高。越来越多的研究指出它可以水解ATP产生腺苷，进而形成免疫抑制性的微环境，促进肿瘤的发展。因此，L-01是肿瘤靶向治疗的一个潜在靶点。本课题旨在选用合适的表达系统及合适的表达纯化条件获得具有蛋白酶活性的蛋白分子。所获得的蛋白可用于抗体筛选，结构研究，抑制剂开发，甚至临床应用。
研究手段
1.L-01蛋白表达载体的构建
（1）引物设计：利用软件SnapGene Viewer及Primer Premier 5.0设计目的基因的引物。
（2）质粒提取：提取含有目的基因的质粒及载体质粒，使用PCR扩增目的基因。
（3）酶切：分别对目的基因质粒及载体质粒进行双酶切，通过琼脂糖电泳分析，切胶回收。
（4）酶连：将目的基因和载体质粒用T4连接酶进行酶连。
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