拟研究或解决的问题：
随着人口老龄化进程的加快与高血压、冠心病等常见心血管病发病率的上升，心衰的患病率正逐年升高。而目前充血性心衰治疗主要包括扩血管药和静脉注射强心药，其主要有耐药性，心动过速及其心律失常等副作用。
近年来研究发现，人脑利钠肽（Human Brain Natriuretic Peptide，hBNP）作为人体分泌的内源性多肽，在病理状况下能迅速减轻心衰患者的呼吸困难程度和全身症状。此发现推动了重组人脑利钠肽的发展，成为一种治疗心衰的重要手段。
本课题考虑到BNP作为32个氨基酸的小肽，在表达过程中不稳定，且不易纯化，因此设计了含组氨酸标签的多克隆位点的His-DsbA-MCS序列，与BNP进行融合表达，构建重组人脑利钠肽（recombinant human- B-type Natriuretic Peptide, rhBNP）。DsbA是近些年来发现的用来帮助二硫键形成的主要伴侣之一，与DsbA融合可实现许多基因的胞内可溶性的高表达。组氨酸标签有利于利用亲和层析的方法对融合蛋白进行纯化。
由于时间关系，本次课题仅建立在构建好的pET-28a-DsbA-BNP/BL21(DE3)重组工程菌的基础上，对下游工艺如发酵和纯化方法及条件进行摸索、探究，以获得符合药用要求的重组蛋白。
拟采用的研究手段：
本课题拟采用的研究手段有摇瓶发酵法，超声波破碎法，SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法，离心法，以及利用层析法对蛋白质进行分离纯化。研究步骤如下所示：
工程菌发酵工艺建立
1：摇瓶培养条件摸索以获得最佳的生物量。
2：摸索异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导菌体产生重组蛋白时的诱导时机和诱导时间。
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