开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题简介及其背景
抗生素是二十世纪人类最伟大的发明之一,它能杀灭或抑制病原微生物,在保障人类健康中作用巨大。自Alexander Fleming于1928年发现青霉素(Penicillin)以来,各种天然、合成、半合成的抗生素被大量开发并投入市场。制药企业常向环境排放大量未经处理或处理不彻底的含抗生素废水,现有水处理技术对污水中含有的相当一部分抗生素没有明显的去除效果[1,2,3]。如抗癫痈药卡马西平(Carbamazepine)的去除率仅为8%,而降血脂药氯贝酸(Clofibrieacid)的去除率几乎为0,全部随污水处理厂出水进入环境。摄入体动物和人体内的抗生素85%以上以原药和代谢产物的形式经由粪尿排出体外,进入生态环境[4],医用抗生素主要经地表水、地下水、固体废弃物等途径进入环境。兽用抗生素常被用于治疗牲畜疾病或者作为饲料添加剂。同样,兽用抗生素在牲畜体内大多数呈原药态或仍具潜在活性的代谢物被排泄出体外[5,6]，从而导致其残留的抗生素进入土壤环境[7]。此外，经过径流与渗透，地表水体中的耐药菌也可能进入土壤中，共同对土壤中的细菌产生作用，形成土壤中的耐药菌。
越来越多的试验证明，抗生素污染是环境中细菌产生耐药性的重要原因之一[8]。由于在抗生素的使用过程中诱导产生了具有忍耐性的抗性菌株，环境致病菌耐药性的增加和扩散，可诱导土壤等环境产生耐药性细菌，并可通过生物链转移到粮食、水果、蔬菜当中，将会对人类的公共健康构成潜在威胁。
本实验从校园中采集表层土壤。采用含氨苄青霉素、卡那霉素、链霉素和万古霉素的LB平板，初步筛选土壤样品中的耐药性微生物，随机挑选6株分离菌株，采用K-B纸片扩散法对分离菌株的耐药性进行验证。
二.研究方法
2.1 预处理培养皿、试管、移液枪枪头、过滤器等的灭菌；氨苄青霉素(100mg/ml)、卡那霉素(10mg/ml)、链霉素(50mg/ml)或万古霉素(2.5mg/ml)的配制；抗生素平板的制备：当灭好菌的培养基的温度处于45-55℃时,加入抗生素溶液,于无菌台上倒平板,每个平板所加的培养基约为15mL,平板倒好冷却后,立即放入避光环境下，37℃培养箱中放置过夜。
2.2 取样[9]
本实验从校园的宿舍组团草坪里、河道旁、以及实验楼附近、食堂附近分别采集表层土壤，表层土壤取样深度为15—20cm.
将土样放入酒精擦拭过的研钵中，除去石块、草根，研磨压碎后，称取1g放入盛有100ml无菌的生理盐水的三角瓶中。振荡5分钟，即10-2的土壤悬液，静置30秒。取1ml土壤悬液，加入到9ml灭菌生理盐水中10倍稀释。
