一、文献综述
多聚糖简称为多糖(Polysaccharide),即由十个以上的单糖分子通过分子间脱水缩合以alpha;-或 beta;-糖苷键链接而成的天然生物大分子,其相对分子量一般为数万乃至数百万。多糖与核酸、蛋白质、脂肪并称为生命的四大基础物质,具有良好的生物活性。在多糖研究中,真菌多糖研究最为广泛和深入,香菇多糖、灵芝多糖、茯苓多糖等[1-3]具有抗肿瘤、抗氧化、降血糖等作用。植物多糖的研究相对于真菌多糖起步较晚,但由于其来源广泛、毒副作用小、价格低廉等越来越受到关注。
本研究所选原料红参(Ginseng radix et rhizoma Rubra)为五加科植物人参(Panax ginseng A.Mey.)经蒸制后的干燥根及根茎,属于我国的传统药材,性寒,味甘、微苦,具有大补元气、复脉固脱、益气摄血的功效[4]。红参中的化学成分包括皂苷、多糖、氨基酸、多肽等[5]。人参多糖和皂苷是红参的主要功效成分,现代药理研究表明,人参多糖具有显著地抗肿瘤、血糖调节、增强免疫功能、抗菌、造血调控、抗氧化、抗辐射等作用[6-9]。
1、红参多糖的提取方法
目前,红参多糖的提取方式主要以水提醇沉法为主。
张国荣等[10]分别利用水提、酸提、碱提的方法提取红参粗糖,比较每种方法的提取效果并通过正交试验优化了提取条件,结果表明,水提多糖效果最好,条件为:料液比 1:8,100℃煮提 3 h,提取三次,多糖得率高达 22%。倪红飞等[11]通过单因素试验和正交试验优化了红参多糖的提取条件为料液比 1:12,100 ℃,3.5 h 提取两次,多糖得率 22%,粗糖中糖含量为 81%。陈杨胜等[12]采用复合提取工艺对红参进行提取,利用水提醇沉法对红参残渣中的多糖进行提取,优化提取条件为:料液比 1:10,100℃煮提 3 h,提取两次,多糖得率为 20%。
刘佳维等[13]以红参粉末为材料,用正交试验优化红参多糖的超声提取工艺。单因素试验以超声功率、超声温度、料液比、超声时间为参考因素,研究其对红参多糖提取效果的影响,并采用正交法进行优化,确定红参多糖的最佳超声提取工艺。
2、红参多糖的脱蛋白方法
提取得到的红参粗多糖通常含有蛋白蛋等成分影响多糖的研究,脱蛋白在多糖纯化过程中较为关键,蛋白质与多糖均属亲水性大分子,一般脱蛋白方法有Sevage法、蛋白酶法等。
Sevage 法[14]的原理是根据蛋白质在氯仿、正丁醇等有机溶液中变性的特点,用氯仿-正丁醇以 4:1 或者5:1 的二元混合体系作为脱除蛋白试剂,与粗多糖的提取液以 1:4 至 1:6 进行混合,剧烈摇晃 30 至 40 分钟,变性的蛋白质与 Sevage 试剂生成不溶物进而与水相进行分离。本方法的特点是避免多糖的降解,但是效率不高,多糖损失量大,且容易产生有机溶剂残留。于雷等[6]在研究红参多糖对小鼠的血糖血脂的调节作用研究中,采用Sevage法脱蛋白,取得不错的效果。
