甾体皂苷质谱裂解规律研究文献综述

 2022-12-27 10:12

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

皂苷是中药中的一类重要活性成分, 根据苷元结构的不同又可分为三萜皂苷和甾体皂苷两种结构类型。甾体皂苷是由糖基和甾体皂苷元缩合而成的糖基皂苷。甾体皂苷元的骨架由27个碳原子构成,母核是环戊烷多氢菲。根据 F环的闭合状态,甾体皂苷主要有螺甾烷型、呋甾烷型和变形螺甾烷型3种类型。

自然界中甾体类化合物分布广泛,存在于薯蓣科、玄参科、龙舌兰科等单子叶植物中,如麦冬、知母、百合等。具有抗癌、抗菌消炎、降低血压等多种生理活性,药用价值高,具有一定的市场开发潜力。如知母皂苷具有防治老年痴呆,抗凝血、抗氧化、抗肿瘤、抗骨质疏松、抗炎降血压、降血糖、降血脂等作用;麦冬皂苷具有保护缺血或缺氧的心脏和脑、抗血栓、抗炎、抗肿瘤、祛痰等作用;薯蓣皂苷具有降血脂、抗肿瘤、保护肝脏、抗炎镇痛、抗病毒等作用。

至今为止,全球生产的甾体药物高达 400 多种,其包括甾体激素类、甾体生物碱、强心苷类、甾体皂苷类等。近年来,随着甾体生物转化技术的不断发展,甾体药物被广泛应用于治疗风湿、心血管、胶原性疾病、淋巴性白血病、人体器官移植、抗肿瘤、细菌性脑炎、皮肤病、内分泌失调等疾病。

麦冬是临床常用中药,始载于《神农本草经》,列为上品。《中国药典》2015 年版记载麦冬为百合科植物麦冬 Ophiopogon japonicas (L.f) Ker -Gawl.的干燥块根。其主要功效为养阴生津、润肺清心,用于治疗肺燥干咳、阴虚痨嗽、喉痹咽痛、津伤口渴、内热消渴、心烦失眠、肠燥便秘。目前,在麦冬的不同部位分离出甾体皂苷类、高异黄酮类、多糖类等成分。甾体皂苷类化合物是麦冬的主要活性部位,其具有抗心脑血管疾病、抗衰老、改善学习记忆障碍、抗肿瘤、抗辐射、抗炎、免疫调节、镇咳、改善肝肺病理性损伤等作用。其提取分离方法包括溶剂提取法、酶提取法及超声提取法。至今,从麦冬中分离出 72 个甾体皂苷,根据其基本化学结构可分为螺甾烷醇型和呋甾烷醇型,且少数为呋甾烷醇型皂苷。螺甾烷醇型化合物中鲁斯可皂苷元和薯蓣皂苷元占绝大部分,在结合的糖基方面主要为三糖苷和二糖苷,四糖苷和单糖苷比例较少,而且糖的连接方式以单糖链为主,双糖链较少。

刘颖等利用UHPLC-LTQ-OrbitrapMS结合高能碰撞诱导裂解技术快速鉴定大鼠口服麦冬甾体皂苷后的血中移行成分。LTQ-Orbitrap MS 兼有高分辨率、高质量精度等诸多优点, 尤其适用于复杂物质体系中化学成分的快速分析。高能诱导裂解技术 (higher energy collisiondissociation, HCD) 作为一种新型的质谱裂解技术,更易获得微量成分的多级质谱图, 并显著改善 CID裂解中产生的低质量碎片丢失效应。应用 UHPLC-LTQ-Orbitrap MS 结合高能碰撞诱导裂解技术 (HCD) 对大鼠口服麦冬甾体皂苷后的入血成分进行快速分析, 对比给药后大鼠血浆、大鼠空白血浆、麦冬甾体皂苷提取物以及对照品之间的色谱和质谱信息, 辅以特征诊断离子判别, 最终共鉴定了 31 个血中移行成分, 包括 13 个呋甾烷醇型甾体皂苷和 18 个 (异) 螺甾醇型甾体皂苷。

知母为百合科植物知母(Anemarrhena asphoseloides Bge.)的干燥根茎。春、秋二季采挖,除去须根和泥沙,晒干,习称 “毛知母”;或除去外皮,晒干。味苦、甘,性寒,归肺、胃、肾经。具有清热泄火,滋阴润燥的功效,可用于外感热病,高热烦渴,肺热燥咳,骨蒸潮热,内热消渴,肠燥便秘。知母的化学成分以甾体皂苷为主,根茎中皂苷含量约为6.0% ,含量高且种类丰富。根据苷元结构的不同进行分类,知母皂苷可分为螺甾皂苷和呋甾皂苷,2015版药典规定其中呋甾皂苷元中知母皂苷BII含量不得低于3.0%。

明继阳等采用HPLC-MSn法分析知母中的皂苷类成分,采用 MCI柱富集皂苷 , 结合 HPLC-ELSD与 HPLC-MSn 对知母皂苷类成分进行分析和鉴定,首次结合正 、负离子的质谱裂解规律对知母皂苷结构鉴定 ,通过负离子质谱提供的 [M Cl]-与 [M-H]- 离子峰来确定化合物的相对分子质量,同时利用甾体皂苷的正离子裂解规律确定化合物类型, 加强了鉴定甾体皂苷的可靠性。

百合 (Lilium brownie F.E.Brown var viriulum Baker)为百合科多年生草本植物,药食两用,主要产于湖南新邵、隆回、邵东等地。中药百合首载于 《神农本草经》,为百合科植物卷丹、百合或细叶百合的肉质鳞茎的鳞片,性味甘寒,具有养阴清肺、清心安神之功,用于治疗阴虚久咳、虚烦、失眠等症。现代药理研究表明,中药百合鳞茎主要含有甾体皂苷、酚性甘油苷、多糖、氨基酸、磷脂以及多种微量元素。皂苷为中药百合药效的物质基础,中药百合中的苷类为甾体皂苷 。

LC-MS 技术兼有优秀的色谱分离能力和高灵敏度、高专属的质谱检测能力, 已成为各类生物基质中化学成分最强有力的分析手段之一。其中,LTQ-Orbitrap MS 兼有高分辨率、高质量精度等诸多优点, 尤其适用于复杂物质体系中化学成分的快速分析。高能诱导裂解技术 (higher energy collisiondissociation, HCD) 作为一种新型的质谱裂解技术,更易获得微量成分的多级质谱图, 并显著改善 CID裂解中产生的低质量碎片丢失效应。

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