开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题的研究背景、意义和目的
随着重组基因工程技术的快速发展以及生物学与化学等学科技术的密切交叉，多肽和蛋白质类药物因具有作用位点专一、使用剂量少、疗效明确等独特优势,已逐渐成为药物研发及临床治疗的热点。目前已有40种以上重要的治疗药物上市,720多种生物技术药物正进行临床试验或接受FDA审评, 其中200种以上的药物进人最后的批准阶段。但是，随着临床使用的蛋白质药物的增多, 人们也发现了这类药物的一些缺点, 如半衰期短、具有免疫原性、溶解性差、生产及储存要求条件高等， 这些问题成为制约蛋白质药物发展的因素。其中最主要的一个就是其在体内极易受到蛋白酶水解作用的影响，导致体内半衰期较短，为了维持其疗效临床应用中需要频繁给药，降低了患者的依从性。因此无论是静脉注射还是作为现在研究热点的口服给药，蛋白质药物在体内的代谢都是其成药性研究的重中之重。
为了更好的了解蛋白药物在体内的代谢情况，我们目前一般通过高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）、表面等离子体共振(surface plasmon resonance，SPR)等方法在体外对其酶解情况进行研究。但是HPLC、SPR各自具有其局限性如样本量大，操作复杂等，一定程度上限制了其在蛋白质药物抗酶解研究中的应用。我们希望通过应用生物膜干涉（Bio-Layer Interferometry ，BLI)技术实现一种更为简单实用的方法。BLI技术是近年来逐步兴起的一种免标记和实时监测的先进技术。其信号来自于由可见光源形成的两束反射光干涉叠加的光谱图的位移，这个位移和结合在传感上器的分子密度有呈正比，并且和结合的分子的大小呈正相关。通过生物素将蛋白药物与传感器表面相连接，在将传感器放入酶液中，观察显示器中曲线的变化从而确定酶对蛋白药物的降解情况。该技术具有高通量、操作简单、应用范围广、低成本、半自动化、反应过程全监测、无需根据样品更换设备部件、探头属于抛弃式等优点，在蛋白药物体外抗酶解研究中具有显著的优势。
实验中我们通过BLI技术筛选出对特定底物有强水解作用的蛋白酶后，可以有针对性的设计该底物分子的改构体，从而增强其抗酶解能力。
本实验通过探索BLI技术在酶学实验中的应用，为多肽或蛋白类药物的早期成药性研究提供一条全新的高通量筛选方法，并为建立更为全面快捷的蛋白药物体外分析评价体系奠定基础，最终促进蛋白质新药的研究与开发。
二、课题研究的主要内容
1.BLI技术在酶学研究中的应用
1.1 探索多肽或蛋白类底物与sensor连接的最佳方式
1.2 探索酶与底物在octet仪器中的最适反应条件:pH、温度、浓度、底物排列顺序等
