一.论文题目：吡柔比星的细菌内毒素方法学验证
二.课题研究的意义：细菌内毒素为外源性致热原，它可激活中性粒细胞等，使之释放出一种内源性热原质，作用于体温调节中枢引起发热。因此，生物制品类、注射用药剂、化学药品类、放射性药物、抗生素类、疫苗类、透析液等制剂以及医疗器材类（如一次性注射器，植入性生物材料）必须经过细菌内毒素检测试验合格后才能使用。鲎试验被称作为细菌内毒素试验，逐渐替代家兔热原试验，但由于部分药品由于自身特殊性无法通过稀释法消除干扰，因此鲎试验还无法完全取代家兔热原试验。细菌内毒素检查法主要有凝胶法和光度测定法两种方法。前者利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素，后者包括浊度法和显色基质（比色）法，系分别利用鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化及产生的凝固酶使特定底物释放出呈色团的多少来定量测定内毒素。吡柔比星为蒽环类抗肿瘤抗生素，化学结构是阿霉素的氨基糖部分4＇位羟基的一个异构体。本品直接嵌入DNA双螺旋链，抑制DNA聚合酶，阻止核酸合成，使瘤细胞终止于G2期不能进入M期，导致肿瘤细胞死亡。本药对白血病P388、L121I、Lewis肺癌、吉田肉瘤、黑色素瘤B16、乳癌CCMT等多种动物肿瘤有抑制作用。为了避免吡柔比星药物存在的细菌内毒素所带来的热源反应，导致药物不合格，所以必须要做此药物的细菌内毒素检验。
三.课题研究的背景: 吡柔比星近年来成为肿瘤治疗中不可或缺的药物。以DNA为靶作用部位，直接破坏肿瘤细胞DNA结构或DNA合成，使其在G2期细胞周期终止，导致肿瘤细胞死亡。近年来，我国乳腺癌的发病率明显增高。随着肿瘤患者人数的增加，治疗费用也在不断上涨。肿瘤在严重影响生命健康的同时，也给患者家庭，社会和国家带来沉重的经济负担。本课题为深圳万乐药业有限公司制定课题，吡柔比星为该公司抗肿瘤药的主要产品之一，该产品的细菌内毒素检查也是生测部门必不可少的检查项目之一。
四.课题研究的目的：确立吡柔比星的细菌内毒素方法学验证。
五.课题研究的内容：1.准备相关试剂与药品:细菌内毒素工作标准品，两个不同厂家生产的鲎试剂，注射用吡柔比星。2.所用的试验方法：细菌内毒素限值的确定；鲎试剂灵敏度的复核；干扰试验。3.试验结果：通过一系列的干扰试验说明通过一系列的干扰试验说明样品浓度为0.5mg/ml时，不干扰内毒素试验，再用G-因子抑制剂试验样品在0.5mg/ml的浓度下，也无增强于抑制作用。
六．课题研究的结果：目前中国药典2010年版已收载了20多个抗生素采用细菌内毒素检查法。由于该方法具有简单，方便，可靠，易操作等优点。将会有越来越多的品种采用细菌内毒素检查法代替热源检查法。本品采用细菌内毒素检查法。通过试验证明本品采用细菌内毒素检查法可行。
七.有关吡柔比星的介绍：【英文名称】 Pirarubicin
【其他名称】 阿克拉霉素B，吡喃阿霉素，Aclacinomycin B，Therarubicin，THP
【适应证】主要用于恶性淋巴瘤、急性白血病、乳腺癌、泌尿道上皮癌(膀胱癌及输尿管癌)、卵巢癌，也可用于子宫颈癌、头颈部癌和胃癌。
