一、背景及意义
氨基酸是蛋白质的基本单元,是人体完成生理功能的必须物质。体内氨基酸水平处于内源性蛋白质的释放与各组织利用之间的动态平衡之中，当这种动态平衡被打破时,就会出现血液氨基酸浓度的改变,导致氨基酸代谢紊乱和相关疾病的发生，另外,氨基酸制剂在临床上广泛应用于相关疾病的治疗和营养支持剂，因此监测体内氨基酸水平的变化规律,对疾病的诊断和治疗有重要意义。近年来的研究表明[1]，肝衰竭时导致的高血氨症使脑组织的葡萄糖利用率明显下降、能量代谢受到干扰，从而导致肝昏迷的发生；同时，高血氨可以增加脑血流量，降低脑血管阻力，增加脑脊液的形成，使颅内压上升，参与了脑水肿的发生；而且，高血氨也破坏了血脑屏障，增加其通透性；高血氨亦损伤了脑细胞的细胞器，干扰细胞器及神经分泌囊泡运动等基本细胞过程。因而氨的毒性是多方面的。
目前已知的治疗高血氨症的药物[1]包括抗生素类、糖皮质激素类及其他药物。抗生素类包括灭滴灵、新霉素、羧苄青霉素、氨苄青霉素等，其中新霉素和氨苄青霉素降血氨作用明显。糖皮质激素类包括地塞米松等。其他还包括有苯甲酸钠、鸟氨酸门冬氨酸酯、5-氟甲基鸟氨酸、肉毒碱、Lactirol等药物。
谷氨酸精氨酸注射液主要成份为精氨酸谷氨酸盐，主要用于治疗因急、慢性肝病如肝硬化、脂肪肝、肝炎所致的高血氨症，以及因肝脏疾患引起的中枢神经系统症状的解除及肝昏迷的抢救。本品临床应用多年，疗效确切，并早已收载于日本药典。
谷氨酸精氨酸注射液静脉滴注给药后，精氨酸谷氨酸盐在体内裂解为精氨酸和谷氨酸发挥治疗作用[2]。有文献报道，精氨酸（6g/30g）经静脉滴注给药后,在体内的药动学行为符合非房室模型，消除半衰期（T1/2）分别为59.69.1分钟及41.62.3分钟，表观分布容积（Vd）分别为689L/kg及332L/kg，清除率（CL）分别为894164mL/min及54424mL/min[3]。
二、相关文献综述
由于氨基酸与人类的生活息息相关,氨基酸分析方法的研究一直是分析领域的重要课题。1958年,Spackman等[6]首先提出了用阳离子交换色谱与柱后茚三酮衍生结合的方法分析蛋白质中的氨基酸,实现了氨基酸分析的自动化。经过50多年的发展,已发展了多种氨基酸分析方法，这些方法按是否衍生化可分为衍生化间接分析法和非衍生化直接分析法,衍生化法又包括柱前衍生化法和柱后衍生化法；按分离方式可分为反相高效液相色谱法、亲水作用色谱法、离子交换色谱法、气相色谱法和毛细管电泳法；按检测方式可分为光谱检测法、电化学检测法、蒸发光散射检测法、积分脉冲安培检测法、质谱法和核磁共振波谱法等。
文献中曾采用旋光度法、TLC法及HPLC法测定谷氨酸精氨酸注射液中的有关物质。
多数氨基酸在紫外-可见光区没有吸收或吸收很弱,光度法难以准确测定。近年来,柱前衍生液相色谱荧光检测法得到广泛应用,使其生成具有紫外或荧光基团的衍生物后进行检测。主要的柱前衍生试剂有邻苯二甲醛(OPA)、氯甲酸芴甲酯(FMOCCl)、6-氨喹啉基-N-琥珀酰亚胺碳酸酯(AQC)及异硫氰酸苯酯(PITC)等,但OPA不与二级胺反应且重现性和衍生物的稳定性较差,FMOC-Cl虽然已被广泛应用,但衍生后需经萃取消除过量试剂的干扰,操作繁琐且易造成疏水衍生物的丢失,AQC在水中的荧光量子效率很低,不利于梯度洗脱。PITC衍生反应速度快,产物单一、稳定,但只能用紫外检测,检出限大约1pmol，灵敏度不够高[4]。衍生化方法操作繁琐、影响因素多、分析时间长，给临床检测带来诸多不便。本实验采用串联质谱(LC-MS/MS)分析方法，无需衍生化，可以在较短时间内完成测定[5]。
