开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、 研究目的及意义
癌症是现代人所面临的健康难题，虽然人们的生活变得越来越好，但是逐年升高的癌症发病率是让人无法忽视的，并且多种癌症也渐渐发生在了年轻人身上。诸如放疗、化疗等传统方法因同时杀伤肿瘤细胞和正常细胞而毒副作用大，效果常常是杀敌一千自损八百。肿瘤坏死因子alpha;能够调控多种炎症介质和促进血管生成因子的合成，在肿瘤的生长具有双刃剑作用。有实验表明体外高浓度的TNF-alpha;能够诱导肿瘤细胞的凋亡，但其致命性的系统性毒性却不能让人忽视，近年来有实验发现低浓度的TNF-alpha;在癌症患者体内会促进肿瘤细胞的增殖与转移，所以说明TNF-alpha;抑制剂有治疗癌症的潜能。近年来关于这方面的研究变得越来越多，但因制备的TNF-alpha;缺乏对肿瘤细胞的特异性而无法充分中和肿瘤组织微环境中的TNF-alpha;。所以，我们希望能够开发出特异性强的抗体，它在微环境中的靶向性以及渗透性能达到比较高的要求。
基于纳米抗体相对分子量小、穿透性强、位阻效应小的优势，本实验以整合素alpha;Ⅴbeta;3为肿瘤靶点，RGD4C为靶向载体，构建anti-TNFalpha;-VHH-RGD4C融合蛋白，利用RGD肽特异性结合整合素的特点，将纳米抗体靶向导入肿瘤组织中，从而减轻毒副作用。
二、 研究或解决的问题
1、通过镍柱亲和层析完成RGD4C-TNFalpha;纳米抗体融合蛋白的纯化
2、通过间接ELISA法测定V-L-R-H与VHH亲和力的测定
3.. V-L-R-H半衰期的测定
三、 研究方法及手段
1.RGD4C-TNFalpha;纳米抗体融合蛋白的发酵
剩余内容已隐藏，您需要先支付 10元 才能查看该篇文章全部内容！立即支付
