治疗H22鼠源肝癌的研究进展肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,居我国恶性肿瘤死亡率的第二位。
迄今为止,外科手术治疗仍是目前肝癌治疗的首选方法,但手术切除存在的突出问题是切除率低,复发率高;据统计,肝癌根治性切除术后5年复发率高达 80%,小肝癌术后复发率也达40%～60%。
由于肝癌手术切除率低于15%,介入化疗也只有10%的有效率,因此,发展肝癌新的治疗手段和药物对于保障 我国人民健康具有十分重要的意义[1]。
1.H22肝癌在小鼠模型上的研究1.1 小鼠肿瘤模型的建立：将处于对数生长期的小鼠肝癌H22细胞制成浓度为1107个/ ml 的细胞悬液，接种于昆明小鼠腹腔,0.2 ml/只；1周后小鼠出现明显腹水，抽取适量腹水细胞，用PBS洗涤后，调整浓度为1105个/ ml，接种于小鼠腋下，0.2 ml/只。
次日，将小鼠随机分为4 组：氨氯地平低剂量组（氨氯地平3mg/ kgd，连续灌胃10 d、氨氯地平高剂量组（氨氯地平10 mg /kgd，连续灌胃10 d）、5-FU 组（5-FU 10 mg/kg3d，隔2 d腹腔注射1 次，共3 次）和空白对照组（生理盐水0.1 ml/10 gd，连续灌胃10d，每组12只。
停药后次日处死小鼠，剥离肿瘤组织，称取瘤重，并按下式计算抑瘤率[2]。
1.2H22肝癌细胞的培养：将H22细胞冻存管从液氮罐中取出，37度快速融化, 无菌条件下1000 r/min 离心10 min , 弃上清。
PBS 平衡盐缓冲液重悬, 重复操作, 加入9 mL 含10% 胎牛血清(FBS)的新鲜细胞培养液, 转入至细胞培养瓶中,于细胞培养箱中37℃5 %CO2 培养。
待细胞培养瓶中细胞密度达到约90 %后, 收集培养液, 1000 r/min 离心10 min , 弃上清, PBS平衡盐缓冲液清洗2 ～ 3 次。
