一、背景介绍
流行性感冒，简称流感，是流感病毒引起的一种急性呼吸道疾病。流感病毒属正粘病毒科，为单股、负链、分节段RNA病毒，易发生变异，传染性强，人群普遍易感，发病率高，历史上在全世界引起多次暴发性流行，是全球关注的重要公共卫生问题。其中甲型流感病毒的传播能力最强。临床常用的特异性抗甲型流感病毒药物有两类，一类是金刚烷胺、金刚乙胺等M2离子通道蛋白抑制剂，另一类是奥司他韦、扎那米韦等NA神经氨酸酶抑制剂[2]。但由于流感病毒极易发生变异，耐药毒株不断出现，这两类药物的作用受到限制。
中药在抑制病毒方面已有数千年历史，在流感的防治中积累了丰富的经验，目前有许多单味中药和复方药物应用临床，具有抑制病毒感染复制、阻止病毒致细胞病变、调节免疫功能等综合作用，在预防和治疗各种流感疾病中发挥着极其重要的作用[1]。
丹参为唇形科植物丹参的干燥根和根茎。中国大部分地区都有分布。具有活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈之功效。用于胸痹心痛，脘腹胁痛，症瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮疡肿痛。现代医学研究表明，丹参能通过多种途径调节机体炎症反应、提高机体免疫从而改善流感症状、防止并发症，实现间接抑制病毒的作用。在避免病毒产生耐药性的同时，提高了机体的防御功能，从而使机体达到“正气存内，邪不可干”的作用。
丹参中抗病毒有效成分已有一定研究。冯科冉[3]等发现丹参中可分离与鉴定的化学成分已有百余种，主要包括丹参酮类、丹酚酸类、挥发油类、多糖类、含氮类化合物等。这些化合物使得丹参具有抗炎、降血糖、抑菌、保肝、抗肿瘤、抗氧化等药理活性。郑燕[4]等通过UPLC-Q-TOF-MS鉴定了丹参提取物的化学成分，将主要化学成分与NA对接，并进行了NA抑制实验，以此来探索丹参提取物对于NA的抑制作用。实验结果表明，丹参提取物中4种化合物（紫草酚酸、迷迭香酸、丹参酮IIA、丹酚酸A）与NA的亲和性良好，均显示出NA抑制活性，其中丹酚酸A表现最佳。李静燕[5]使用多种不同的检测方法来检测丹酚酸Ａ和隐丹参酮对甲型流感病毒的抑制活性，发现丹酚酸Ａ和隐丹参酮对甲型流感病毒的RNA表达产生了严重影响，证实了丹酚酸Ａ和隐丹参酮存在对甲型流感病毒的活性抑制作用。徐国双[6]发现甲型流感病毒尤其是强毒力毒株感染机体后，肺组织内的各种细胞释放大量的炎性介质，进而导致巨噬细胞等免疫细胞的炎性浸润，造成炎症性病理损伤，加重病毒感染的严重程度，这是流感病毒感染高病死率的重要原因之一。他同时进行了多组对照实验来验证二氢丹参酮I与PA-X单抗二者联合使用可以改善IAV感染介导的肺免疫损伤。而白春香[7]等对门诊处小儿流感病例进行了临床治疗，将随机患者分为两组，发现实验组小儿在额外注射了含有丹参素已酸等有效成分的丹参注射液后，有着比仅注射头孢曲松钠的对照组小儿更好的治疗效果。
以上研究表明，丹参提取物如丹酚酸、丹参酮等有着一定的抗流感病毒作用，同时对流感病毒造成的病理症状具有缓解能力，但具体生效机制还有待后续研究。
- 研究目的
本实验旨在通过小鼠流感模型筛选具有抗流感病毒作用的丹参有效成分，明确其抗流感病毒的效果。
- 研究方法
1.小鼠流感病毒肺炎模型的建立及小鼠分组、给药
乙醚麻醉小鼠，50mu;l稀释后的流感病毒H1N1悬液滴鼻感染小鼠。18-20 g的ICR小鼠，未感染流感病毒ICR小鼠设为正常对照组，流感病毒感染后小鼠随机分为6组：病毒对照组；奥司他韦单剂量组50 mg/kg/d；丹参提取物低剂量组5mg/kg/d；丹参提取物中剂量组50mg/kg/d；丹参提取物高剂量100mg/kg/d。每组10只，雌雄各半。灌胃给药，每日一次，每次0.2 ml，给药两周。每日称取体重并记录，同时记录生存率的变化。
2.肺重与体重比例，肺组织干湿重比例的测定
