开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
- 课题研究的背景
生理情况下,血小板与血小板之间具有黏附成血小板粒或块的功能称血小板聚集功能,测定血小板聚集功能的方法称血小板聚集试验(PAgT),常用比浊法。比浊法是在特定的连续搅拌条件下,在富血小板血浆(PRP)内加入诱导剂,血小板聚集,悬液的浊度减低,透光度增加。光电池将光浊度的变化转换为电讯号的变化,在记录仪上予以记录。根据描记曲线即可计算出血小板聚集的程度和速度。PAgT减低反映血小板聚集功能减低。常见于获得性血小板功能减低如:尿毒症、肝硬化、MDS、原发性血小板减少性紫癜、急性白血病、服用抗血小板药物、低(无)纤维蛋白原血症等。还见于遗传性血小板功能缺陷,不同的血小板功能缺陷病对各种诱导剂的反应不同。血小板无力症:ADP、胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集减低和不聚集;巨大血小板综合征:ADP、胶原花生四烯酸诱导的血小板聚集正常,但维斯托霉素诱导的血小板不凝集;贮存池病:致密颗粒缺陷时,ADP诱导的聚集常减低,无二相聚集;胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集正常;alpha;颗粒缺陷时,血小板凝集和聚集均正常;血小板花生四烯酸代谢缺陷:ADP诱导的聚集常减低,无二相聚集,胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集均低下。PAgT增高的原因可能有高凝状态和血栓性疾病,如急性心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管疾病、深静脉血栓形形形成、先天性紫癜性心脏病、高beta;脂蛋白血症、抗原-抗体复合物反应、人工瓣膜、口服避孕药、晚期妊娠、高脂血症、抗原-抗体复合物反应和瓣膜移植术等。目前看来,血小板聚集功能的增强或降低在某些伴有血液凝固性异常的疾病和出血性疾病的发生发展中的作用已引起普遍重视,且血小板聚集功能的检测对于抗血小板药物的疗效监测、抗血小板药物的开发与设计都有重要的意义。由此,设计并优化合理的高效的血小板聚集实验的方法尤为关键。
二、课题研究的目的和意义
血小板聚集是血小板参与止血和血栓形成的重要环节,是血小板的主要功能,对于机体生理性及病理性的改变有一定的临床意义,评价血小板聚集功能的检测对疾病诊断、鉴别、预防都有重要意义。血小板聚集实验简便、实用、经济,但影响血小板聚集试验的因素有很多。如抗凝剂用量、血小板浓度、标本放置时间、PRP离心时间、样品的温育时间及药物干扰等。此课题将检测血小板聚集试验以发现其影响因素并优化实验方案,使血小板聚集实验在机体生理性和病理性的临床应用有最大化的意义和用处。
- 课题研究的主要内容
1.了解血小板聚集实验的原理并进行分析可能得影响因素
2.查阅文献资料设计验证实验
3.从血液来源:人、兔、大鼠、小鼠优化实验
4.从血液采血至进行试验的时间判断优化实验
5.从抗凝剂及浓度的影响(EDTA、枸橼酸钠)优化实验
6.从PRP离心速度及时间的选择优化实验
