开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题的研究背景、目的和意义
课题研究的背景:
肺炎支原体英文名为：Mycoplasma pneumoniae, 简称Mp，其感染不但可以引起支原体肺炎、哮喘、支气管炎、气管炎等呼吸道疾病,还可致动脉粥样硬化、心肌炎、冠心病、脑膜炎等肺外感染及并发症[1]。Mp是人类原发性非典型肺炎的主要病原体,因其生物结构特殊，没有细胞壁,所引起感染的治疗方式与其它常规病毒和细菌感染大有不同,仅有大环内酯类等少数抗生素对其有抑制作用，加上耐药菌株数量不断增多，临床上对Mp引起的感染治疗难度越来越大[2]。因此，通过研制Mp特异性免疫抗原，进行疫苗的开发及制备,在预防阶段上下功夫，从而降低发病率将成为控制Mp感染的关键。Mp致病的重要因素是其细胞表面上的粘附蛋白能与宿主细胞受体结合,引起机体免疫反应。研究表明：其中三种蛋白（P1,P30，P116)抗原性较强，应用基因工程技术将其基因重组后表达制备的抗原,具有较高的特异性和敏感性，为后续Mp疫苗开发和药物研制奠定基础[2][4]。
课题研究的目的：
通过学习生物化学，分子生物学等知识，分析肺炎支原体表面膜蛋白序列，筛选出特异性蛋白片段。优化其基因序列，并进行化学合成。利用基因工程技术表达特异性重组蛋白片段，用于后续疫苗开发和药物研制等。
二、课题研究的意义：
通过学习细胞培养，蛋白质分离纯化以及蛋白质初步鉴定等技术，熟悉重组生物技术药物制备的一般过程。
三、采用的研究手段：
本课题利用分子生物学结和生物化学中的知识来进行Mp抗原的纯化、鉴定及检测，分析出Mp表面的粘附蛋白（即具有免疫原性的蛋白）的优势蛋白片段，优化其基因序列，对其进行化学合成并连接至质粒载体上，转化至高拷贝菌株中进行扩增复制，转移至感受态细胞中进行高表达，得到高表达工程菌，通过诱导，获取目的蛋白，并对该目的蛋白进行有效的纯化，检测其抗原性，以此蛋白为基础制备肺炎支原体疫苗。
