开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、课题背景
香菇(Lentinus edodes)属担子菌纲、伞菌目侧耳科真菌,又称冬菇、花菇,是著名的药食同源之品,素有“菇中皇后”的美誉。我国传统医药学对香菇的药性及功用曾有著述,《本草纲目》 中记载香菇“性甘、味平、无毒,益气不饥,治风破血,益味助食,理小便不禁”,《医林纂要》中记载香菇“可托豆毒”,《本经逢原》中记载香菇“大益胃气”。现代医学研究表明,香菇中含多种药理活性良好的药用成分,其中最主要活性成分即为香菇多糖(Lentinan,LNT)。
自1969年日本学者Chihara等首次从香菇子实体中分离出香菇多糖,因为其明显抗肿瘤活性成为了真菌多糖领域的热点。近年来,相关研究表明,香菇多糖除具有抗肿瘤活性外,还具有抗疲劳、抗氧化、抗糖尿病、抗病毒、抗辐射、防结肠炎以及免疫调节等多种生物活性,目前学者普遍认为香菇多糖的活性与其理化性质、化学结构和糖链构象有很大关系。香菇多糖是一种以beta;-1,3-D-葡聚糖残基为主链,同时主链上随机分布beta;-1,6-葡聚糖残基侧链的极性大分子化合物,相对分子质量主要分布在 4times; 105~8times; 105,糖链构象为多股螺旋结构。
香菇多糖在目前临床中已被广泛应用,其中香菇多糖注射剂已作为肿瘤的辅助治疗的常用制剂,并且对乙肝病毒和艾滋病病毒也有一定抑制作用;而香菇多糖口服制剂,如香菇多糖片和香菇多糖胶囊,在免疫调节、血糖调节以及急性酒精性肝损伤的治疗上有明显的效果。尽管有关香菇多糖的药理作用的研究及其制剂的临床应用日益增多,但有关香菇多糖在体内的药物代谢动力学相关信息却鲜有报道。多糖完善的药代动力学信息对多糖的进一步开发利用具有重要的意义:①多糖药代动力学信息有利于更深入地阐明其药理作用机制;②多糖的药代动力学信息与其临床安全应用息息相关;③利用多糖的药代动力学特征,设计靶向制剂,或者改善小分子药物的药代动力学特征,从而增效减毒。因此本课题拟采用与以往研究不同的荧光素对香菇多糖进行荧光标记,以便于后续实验对其在生物样本中进行定性检测,为LNT在体内吸收代谢机制研究奠定基础。
二、要解决的问题
1. 香菇多糖没有紫外吸收基团和荧光发射基团,因此难以用紫外检测器和荧光检测器进行检测;
2. 香菇多糖存在一定分子量分布,且分子量大,很难用质谱检测;
3.生物样品中含有大量内源性多糖会干扰香菇多糖的检测结果。
4. 传统的荧光标记由于是在有机相中进行反应,会对水溶性的香菇多糖结构产生影响,进而影响其生物活性
