开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、选题的目的与意义
肺纤维化是一种导致肺功能进行性丧失的肺间质疾病,主要是由于肺组织损伤时过度修复导致成纤维细胞过度增殖以及细胞外基质大量聚集而引发的。肺纤维化会严重影响人的呼吸功能,临床主要表现为呼吸困难,并伴有干咳、乏力,严重者最终会丧失呼吸功能,因呼吸衰竭而死。在临床上很难预测并控制肺纤维化的发展情况,目前还没有有效的方法治疗肺纤维化。丹参是常用的活血化瘀中药,其主要药效成分是丹参酮类和丹酚酸类。近年来,丹参中的一些活性成分在临床上治疗肺纤维化表现出了较好的疗效,特别是丹参酮ⅡA,且较临床上常用的西药吡非尼酮和尼达尼布毒副作用较小,如果能通过进一步的研究将丹参中具体活性成分的作用机制阐明,明确其作用靶点,对于制剂的开发和其在临床上的合理应用都会有很大的帮助。
二、研究内容
从体外水平入手,使用人源肺成纤维细胞MRC-5,以转化生长因子(TGF-beta;1)作为体外诱导剂,模拟肺纤维化病程中成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的过程,考察丹参酮IIA对成纤维细胞向肌成纤维细胞异常分化的生物学过程中的作用。
三、研究方法
1、确定药物对人源成纤维细胞MRC-5的给药浓度范围;
2、以转化生长因子(TGF-beta;1)为体外诱导剂建立MRC-5肺纤维化模型;
3、观察给药后丹参酮IIA对成纤维细胞向肌成纤维细胞分化过程的影响;
4、利用Western Blot、定量PCR等方法检测相关蛋白及其mRNA的表达量;
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