开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
背景介绍:
芍药( Paeonia lactifloraPall. ) 为毛茛科多年生宿根草本植物,是一味可以与其他草药联合使用的、应用广泛的中药材[1]。芍药苷为芍药的主要活性成分之一,具有良好的保肝、解痉镇痛、抗溃疡、降温解热、抗氧化、抗血小板聚集、抗动脉硬化、抗炎、调节血脂、改善神经突触可塑性损伤等作用。此外,实验研究表明,芍药苷在改善学习记忆功能衰退、保护脑缺血损伤、治疗帕金森病等方面均有着一定的治疗效果。芍药苷的作用机制则尚未明确,多个受体和离子通道都被报道可能是芍药苷发挥药理作用的主要靶点[2]。
疼痛是一种令人不快的、复杂的、主观的感觉,它也是一种临床常见的症状。国际疼痛研究协会(International Association for the Study of Pain, ISAP)将疼痛定义为,一种不愉快的感觉和情绪体验,往往伴随有实际的或潜在的组织伤害[3]。当受到各种伤害性刺激后,刺激转为神经冲动,通过传入神经纤维传递到背根神经节(dorsal root ganglia, DRG),最终传递到高级神经中枢,产生痛觉。而神经细胞中动作电位的产生和传导又依赖于细胞膜上的电压门控钠离子通道(voltage-gated sodium channels, VGSCs)。当细胞膜去极化时,伤害性感受神经元细胞膜上的电压门控钠离子通道被激活,钠离子内流,细胞膜去极化,引发动作电位,从而引发疼痛[4,5]。
研究意义:
背根神经节(Dorsal root gangline,DRG)来源于神经嵴的脊神经节内的感觉神经母细胞,该细胞的轴突呈束状,左右对称地从神经管的背部进入,此时的脊神经节即改称为背根神经节。它是感觉传导的初级神经元,是神经性疼痛治疗的重要靶区。
电压门控钠通道(voltagegated sodium channels,VGSCs) 是人类历史上第一个从分子水平上认识的通道,是神经、肌肉以及其他可兴奋细胞动作电位产生的重要原因之一[6]。钠通道由一个alpha;亚基(260 kD)和一个或多个beta;亚基(33~36 kD以二硫键或非共价键结合。 根据对河豚毒素(TTX)敏感性的不同,细胞膜上的钠通道可分为:TTX敏感型(TTX-S)和TTX不敏感型(TTX-R)[7,8]。
TTX敏感型(TTX-S)钠通道电流主要由Nav1. 1、Nav1. 2、Nav1. 6和Nav1. 7介导[9,10]。其中,Nav1.7只存在于周围神经系统中,因此,以Nav1.7为靶点治疗疼痛时,理论上可以把药理作用绝大部分限制在周围神经系统范围内,以此来减少可能产生的副作用,为良好的疼痛治疗靶点[5]。而研究表明,芍药苷也具有镇痛作用,但其作用的机制尚未明确。TTX敏感性(TTX-S) 钠电流在神经兴奋传导过程中起着重要作用,为了探讨芍药苷的作用机制,我们观察研究芍药苷对TTX-S钠通道电流作用。
拟解决的问题:
本实验通过急性分离小鼠背根神经节细胞,采用膜片钳技术记录小鼠DRG细胞TTX-S细胞钠通道电流,观察芍药苷对TTX-S钠电流的影响,研究芍药苷对神经抑制作用的可能机制。
