开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、研究主要目的和意义:
炎症(Inflammation)是十分常见而又重要的基本病理过程,体表的外伤感染和各器官的大部分常见病和多发病(如疖、痈、肺炎、肝炎、肾炎等)都属于炎症性疾病。炎症反应常表现为红、肿、热、痛,较严重时还会引发心、肝、肾等器官的实质细胞发生不同程度的变性、坏死和器官功能障碍,影响人类的健康。现在的抗炎药主要分为两大类:一类是甾体类抗炎药,即是肾上腺皮质分泌的糖皮质激素氢化可的松和它人工合成的衍生物;另一类就是非甾体类抗炎药(Non-Steroid Anti-Inflammatory Drugs, NSAIDs)[1]。如果长期使用甾体类抗炎药会使肾上腺皮质的功能衰退从而引起一系列的代谢性疾病,而使用非甾体类抗炎药会有胃肠道的副作用,长期使用会导致心血管和肾的损害。目前,人类对抗炎药的需求量非常大,然而许多市场上的抗炎药存在不良反应等,所以寻找效果好且副作用较小的抗炎药是十分有必要的[2]。
炎症过程中由细胞释放或者由体液产生的,参与到或者是引起炎症反应的化学物质称之为炎症介质(inflammatory mediator),其中包括类脂质炎症介质、细胞因子以及粘附分子等。细胞因子(cytokine, CK)是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质,具有调节固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长以及损伤组织修复等多种功能。药物的抗炎及免疫调节功能都与抑制炎性细胞因子的产生有关,其对于炎性细胞的合成与分泌细胞因子有着双向调节作用。细胞因子可被分为白细胞介素(interleukin, IL)、干扰素(interferon, IFN)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)、集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF)、趋化因子(chemokines)、生长因子(growth factor, GF)等[3]。众多的细胞因子在体内通过旁分泌、自分泌或者内分泌等方式发挥作用,具有多效性、拮抗性、重叠性、协同性等多种生理特性,形成了十分复杂的细胞因子调节网络,参与了人体多种重要的生理功能。IL-1beta;是重要的炎性细胞因子,主要由巨噬细胞、单核细胞和T细胞产生,它能刺激炎性因子的分泌,如能够促进淋巴细胞的增殖及分化,刺激T淋巴细胞的活化和介导免疫球蛋白的分泌等。同时,IL-1beta;也能促进血管内皮细胞及白细胞的粘附,趋化中性粒细胞及其他炎性细胞向炎症部位聚集,从而引起一系列的炎症反应,造成组织的损伤[4-5]。因而IL-1beta;在炎症反应中发挥了重要的作用。
柠檬苦素类似物(Limonoid)是一类三萜类的物质,为重要的植物次生代谢产物之一,主要存在于芸香科和楝科的多种植物中[6-7]。人们对柠檬苦素类似物的生物活性做了大量研究,发现其在抗癌、抗炎、镇痛、除虫、抗氧化性、调节血糖等方面具有作用,因此柠檬苦素类似物的研究受到越来越多的重视,而且最重要的是可以从柑桔果实的皮渣的废弃物中提取柠檬苦素类的化合物,提取效率很高,原料来源丰富也相对廉价,所以说具有广阔的生产前景。Matsuda等[8]报道了从疏毛吴茱萸中分离出的柠檬苦素具有明显的镇痛、抗炎作用。但相关的研究在国内起步较晚,关于柠檬苦素的抗炎镇痛作用报道较少,所以我们准备通过研究柠檬苦素类似物对炎性细胞因子IL-1beta;的影响来探索其抗炎活性。
二、拟研究或解决的问题:
1.建立用脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)诱导巨噬细胞产生炎症的造模方法;
2.掌握用酶联免疫法(ELISA)测定巨噬细胞中IL-1beta;的含量;
3.探索柠檬苦素类似物的抗炎作用。
三、采用的实验方法:
