开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题背景和立题依据
乳腺癌是女性最常见的癌症之一，在确诊的乳腺癌患者中，约25%~30%的乳腺癌患者存在人表皮生长因子受体2(HER2)基阂扩增或者为高表达,这部分患者通常更容易出现复发转移、生存期短[1-2]。以往的治疗方法不能起到明显的疗效，作用于HER2靶点的药物出现并运用于临床，对HER2阳性肿瘤患者带来了较高的生存收益。
随着医学的不断发展，对于肿瘤治疗也有越来越高的要求，以往的手术、化疗、放疗、内分泌治疗等传统手段已经不能满足于临床个体化精准治疗，近年来抗体类药物的研究与开发已经成为生物技术领域的热点，抗肿瘤抗体类药物具有其鲜明的优越性。高亲和性和特异性使得抗体药物高效特异性地发挥靶向治疗作用，并逐渐在临床中普遍应用。
曲妥珠单抗(trastuzumab),商品名赫赛汀(Herceptin),罗氏制药有限公司产品。是针对HER2/neu原癌基因编码的受体酪氨酸激酶胞外段的人源化单克隆抗体,经过临床前和临床研究的验证,曲妥珠单抗已被批准用于HER2高表达乳腺癌患者的术后辅助治疗,及HER2高表达转移性乳腺癌患者的治疗。[3-4]虽然靶向药物临床效果显而易见，但有效率也仅为12%－34%。[5]耐药机制复杂，并且不可小视，影响有效率的因素仍需进一步研究。而血药浓度检测作为一项基本指标，故建立一种规范的检测方法是必不可少的。
目前临床实际治疗过程中还无法对病人的个体化用药进行指导，没有科学标准以及统一精准的临床血样浓度的检测方法，故在本次研究中通过分析不同给药周期、不同患者之间，或者同一患者不同给药周期的血药浓度的差异，分析其之间的关系，以期在未来为临床检测血液中抗体有效浓度提供有效的工具，为将来建立一种抗肿瘤抗体类药物的精准血药浓度检测方法作为一项基础探索研究，为临床中个体化用药、合理分配医疗资源奠定基础。
抗肿瘤抗体类药物及其类似药的血药浓度检测多采用生物分析方法，如ELISA、SPR、HPLC-MS等，用来检测血清及其他样本。其中酶联免疫法（ELISA）方法是目前临床上生物标志物（Biomarker）筛选和检测普遍采用的方法之一[6]。现阶段对于抗体类药物的检测国内外一致都选用ELISA，此方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点。实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位，利用抗原抗体反应的原理在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。血药浓度的检测作为临床pk-pd的重要指标，对指导临床用药具有作用。
二、研究目的
1. 采用两种ELISA方法检测接受曲妥珠单抗治疗的HER2阳性乳腺癌患者外周血中赫赛汀的血药浓度，通过对两种方法的比较研究，初步建立一种相对成熟的ELISA竞争法，优化对赫赛汀定量的操作细节。
2. 建立一种临床检测血液中抗体药物有效浓度指标的工具。
