目前,疾病的诊断需要结合临床表现(病史、症状和体征)、实验室检查、影像学检查等结果进行综合判断,涉及流行病学、病理生理学、免疫学、微生物学、生物化学和遗传学等多学科内容。
随着人类平均寿命的延长和诸多环境因素的变化,对于疾病的诊断模式和诊断方法也更加多样化,因而临床实践对诊断手段的实用性、准确性及预见性也提出了更高的要求。
有研究报道,细胞及外周体液中 miRNA的表达谱改变与各种生理和病理状态相关,这些特异表达的 miRNA 既是其功能研究的基础,又是优良的疾病标记物,可以用作相关疾病的诊断分子或防治靶标。
本课题构建了一种基于脱氧核酶快速响应体液中miRNA的探针,以血糖仪等快速检测手段实现对miRNA的快速、灵敏、简便、定量检测,以达到疾病早期诊断的目的。
研究背景近年来,miRNA作为疾病诊断标志物得到越来越多的关注。
miRNA 是一类内生的、长度约20-24个碱基的非编码的单链小分子RNA,广泛存在于人体和几乎所有模式生物的细胞中,进化上具有极高的保守性、时序性、组织特异性及稳定性等特点。
miRNA可通过与靶基因的3端非翻译区(3untranslated regions,3UTR) 的特异性的配对 (完全配对或部分配对)结合来降解mRNA或抑制mRNA翻译,从而调控靶基因表达水平。
作为调控分子,多数miRNA具有与其他基因表达调控分子共同的特点,即细胞和组织特异性、表达时序性、结构可变性及不同物种间的高度同源性[1]。
血液、尿液、胃液等体液中也存在着与循环 DNA、循环细胞类似,且源自肿瘤等原发病灶的循环miRNA分子[2][3]。
这些循环miRNA具有良好的稳定性,在室温放置24h、多次冻融、RNA酶和DNA酶作用及保存温度改变等条件下均无明显降解[4],考虑与miRNA存在于凋亡小体、微泡、外染色体等脂质或脂蛋白复合物中密切相关[5]。
